去迷走神经对大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表达的影响
目的: 研究去迷走神经对大鼠再生肝中Atf3和Nr2f1的表达影响，进一步探讨迷走神经在肝再生过程中的作用及其调控机制。 方法: 将108只雄性大鼠分为随机的2组:PH组:2/3肝切除组;PHV组:去迷走神经2/3肝切除组。分别在术后0h、2h、12h、24h、36h、48h、72h、120h、168h处死，取大鼠的肝脏并分成两份，一份保存在中性福尔马林试剂中，另一份保存于液氮中。用免疫组织化学方法和免疫印迹法(Western Blot)检测肝组织中Atf3和Nr2f1蛋白的表达;实时荧光定量法(RT-PCR)检测肝组织中Atf3mRNA和Nr2f1 mRNA的表达。 结果: (1)免疫组化法检测大鼠再生肝中Atf3的表达:PHV组大鼠在术后24h～36h的阳性表达量明显高于PH组(P＜0.01)，在12h和48h表达量低于PH组。 (2)免疫组化法检测大鼠的再生肝中Nr2f1的表达:相对于PH组来说，PHV组大鼠的表达量在术后12h、36h、48h、72h、168h低于PH组，在术后2h、24h、120h处表达量稍高于PH组，36h表达量上升到最高，在术后12h、48h和168h时与PH组有显著性差异(P＜0.05)。 (3)RT-PCR法检测大鼠再生肝组织中Atf3 mRNA的表达结果:与PH组相对比，PHV组的大鼠术后24h～36h肝组织内Atf3 mRNA的表达量上升，且高于PH组，在术后2h、36h和120h有显著性差异(P＜0.05)。 (4)RT-PCR法检测大鼠再生肝组织中Nr2f1 mRNA的表达结果:与PH组相对比，PHV组的大鼠，手术后Nr2f1 mRNA的表达量在0h～168h基本都低于PH组，在术后12h和48h有极显著差异(P＜0.05)。 (5)WB法检测大鼠的再生肝组织中Atf3的蛋白的表达结果:与PH组相对比，PHV组大鼠手术后至48h表达量高于PH组，在48h～120h表达量低于PH组，有显著性差异(P＜0.05)。 (6)WB法检测大鼠再生肝组织中Nr2f1的蛋白表达结果:与PH组相比，PHV组大鼠术后Nr2f1的蛋白量表达变化与PH组的变化相似，但整体都比PH组的表达量低，与PH组相比有显著性差异(P＜0.01)。 结论: (1)研究结果进一步提示去迷走神经可能对大鼠肝组织再生起促进作用。 (2)去迷走神经对大鼠肝再生的促进作用，可能是通过促进再生肝组织中Atf3的表达，抑制再生肝组织中Nr2f1的表达来实现的。
肝再生;去迷走神经;Atf3基因;Nr2f1抗体;调控机制
河南师范大学
硕士
生物学、细胞生物学
张新胜;徐存拴
2015
中文
R333.4
73
2015-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）