葛仙米对二乙基亚硝胺诱发小鼠肝脏癌前病变的干预作用研究
葛仙米作为一种具有悠久历史的食用藻类，富含多糖与藻胆蛋白。藻多糖及藻胆蛋白具有多种优异的生物活性，其抑癌作用尤其受到医学和食品界的高度关注。本实验以DENA为诱癌剂，建立小鼠肝脏癌变不同时期的动物模型，同时喂食葛仙米藻浆进行干预，以观察葛仙米对DENA导致小鼠肝损伤的保护作用及其肝癌的干预作用。本实验分为4组，即对照组（腹腔注射生理盐水，自由饮用无菌蒸馏水）;葛仙米组（腹腔注射生理盐水，自由饮用葛仙米藻浆，代替无菌蒸馏水）;诱癌组（腹腔注射DENA，自由饮用无菌蒸馏水）和干预组（腹腔注射DENA，自由饮用葛仙米藻浆，代替无菌蒸馏水）。全部4组小鼠均喂食正常饲料。自诱癌之日起，分别在14d、28 d、56 d、70 d、84 d处死小鼠，取血清及肝脏组织，通过酶活、蛋白、mRNA水平和组织病理学检测，探讨葛仙米对DENA诱发小鼠肝脏癌前病变的影响和干预作用，为葛仙米的药用和食用价值研发提供科学依据和理论参考。本实验主要结果如下: (1)喂食葛仙米的小鼠在整个实验过程中，与对照组相比，体重增长较快，皮毛光滑柔顺，行动灵敏，精神状态良好;诱癌组小鼠随着DENA处理时间的延长，后期出现食量减少，体型消瘦，精神萎靡等症状;葛仙米干预组小鼠随着实验周期的延长，也出现类似诱癌组小鼠的症状，但出现时间晚于诱癌组，且程度较轻。脏器指数结果显示，诱癌组小鼠及干预组小鼠的肝脏指数显著高于对照组与葛仙米组，而干预组小鼠肝脏指数低于诱癌组小鼠，但差异不大。以上结果说明葛仙米对小鼠有促生长作用，并对DENA导致小鼠的肝损伤有一定程度的保护作用。 (2)小鼠血液学指标检测结果显示，葛仙米组小鼠血清中，ALT与AST的活性与对照组无显著差异;诱癌组与干预组小鼠血清中ALT与AST的活性显著高于对照组，干预组小鼠血清中这2种酶的活性都低于诱癌组。该结果也说明葛仙米在一定程度上减轻了DENA对小鼠肝脏的损伤。 (3)通过ELISA检测血清中AFP的蛋白含量变化，结果显示，随着实验进程的延长，葛仙米组小鼠血清中AFP蛋白含量维持在正常范围之内，与对照组无显著差异;诱癌组及干预组小鼠血清中AFP的含量显著升高但与诱癌组相比升高较为缓慢。 (4)通过实时定量PCR技术检测了小鼠肝脏中AFP、bcl-2、p53、PTEN基因的mRNA水平，结果显示，干预组小鼠肝脏中AFP、bcl-2、p53的相对表达量均低于诱癌组，而PTEN的相对表达量高于诱癌组。 (5)小鼠肝脏组织病理学检测结果表明，诱癌组小鼠在14～28 d多呈炎性反应，42～56 d出现嗜酸性肝细胞，此后逐渐形成肝细胞增生结节，70 d后肝细胞大片坏死，出现癌变。干预组小鼠诱癌病症出现较DENA组晚，且程度较浅。 结论:喂食葛仙米可明显促进小鼠的生长发育;饲料中添加一定量的葛仙米不仅对DENA诱发小鼠肝脏癌变及其进程具有一定的干预作用，而且对DENA导致小鼠肝毒性和肝损伤具有一定的保护和减缓作用。另外，喂食葛仙米还延迟了DENA诱发小鼠肝脏癌变的进程，并延长了实验处理小鼠的生存时间。
葛仙米;肝脏癌前病变;干预作用;生物活性
河南师范大学
硕士
水生生物学
李效宇
2015
中文
R282.71;R735.7
70
2015-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）