岩黄连总碱对人肺癌细胞的作用及其可能的作用机制
目的：岩黄连总碱对人肺癌细胞的作用及其可能作用机制。 方法：在无菌条件下培养人A549细胞，用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测单用岩黄连总碱在不同浓度(0.1 g/L、0.05 g/L、0.01 g/L、0.005 g/L)分别作用24 h、48 h、72 h后，对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况，用MTT法检测对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况，流式细胞仪检测不同岩黄连总碱药物浓度对A549细胞诱导凋亡的作用及分析各组细胞周期的分布。在体外培养人肺癌A549细胞株至对数生长期，将其分为3组:阴性对照组、岩黄连总碱(0.01g/L)、岩黄连总碱(0.02g/L)组。采用细胞划痕法，将A549细胞接种于12孔板，分别在0时和48时拍照，运用倒置显微镜拍照，并测量细胞划痕的宽度(S)，每组设三个复孔，最后计算各组细胞在不同药物处理下的细胞迁移率。RT-PCR法检测药物作用后人肺腺癌A549细胞中snail、E-cadherin mRNA的表达影响变化情况。Western-blot法检测药物作用后人肺腺癌A549细胞中snail、E-cadherin蛋白的表达变化。 结果：岩黄连总碱处理48h后测得A549细胞被阻滞在G1期，从而导致A549细胞增殖抑制。流式细胞仪检测结果显示岩黄连总碱诱导A549细胞凋亡作用随着药物浓度的增加，凋亡率升高。细胞划痕实验证实岩黄连总碱组抑制肺癌A549细胞的迁移。RT-PCR结果提示岩黄连总碱组上调了E-cadherin mRNA的表达，下调snail mRNA的表达(P＜0.05)。Western-blot结果显示:岩黄连总碱组E-cadherin蛋白表达增加，snail蛋白表达减少(P＜0.05)。 结论：岩黄连总碱能抑制人肺癌A549细胞增殖并阻滞在G1期，阻滞作用呈剂量依赖性，能诱导A549细胞发生细胞凋亡，抑制细胞的迁移;Western的结果提示抑制细胞迁移的机制可能与下调snail1的表达，和上调E-cadherin的表达有关。
肺腺肿瘤;中药治疗;岩黄连总碱;疗效评价
桂林医学院
硕士
内科学
王绩英
2015
中文
R734.2;R730.52
46
2015-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）