智三针干预对AD模型大鼠学习记忆的影响及作用机制研究
目的：本研究以AD大鼠模型为实验载体，应用智三针进行干预，通过观察智三针对AD大鼠的学习记忆能力、大脑海马PP1、PP2A蛋白表达、AChAT（胆碱乙酰化酶）、AChE（乙酰胆碱酯酶）活性以及大鼠血清GSH-Px活力影响，初步探讨针刺的抗AD作用机制。 方法：将80只SD雄性大鼠按体重随机分成A、B、C、D四组，每组20只，分别编予A1～20号、B1～20号、C1～20、D1～20号，其中D组又称正常组。4组均经腹腔内连续注射D-半乳糖50mg/Kg/d6周，之后ABC三组进行造模。模型组大鼠用牙科钻在颅骨上打孔，注射Aβ1-40溶液2ul(10ug)。AD模型大鼠被分为三组，分别是智三针组、非穴组和模型组。造模成功1周后，智三针组予针刺神庭及双侧本神穴，非穴组予针刺大鼠双肋下固定非穴点针刺方法:毫针针刺，均匀捻转，角度180°，频率60次/min。持续刺激2min，休息1min，如此反复，持续15min。疗程:每天1次，周末休息，治疗4周，共20次。正常组大鼠和模型组大鼠同样抓取、固定、取穴、消毒，但是不予针刺治疗。沿额极后2mm-8mm冠状位切取大脑海马组织，做免疫组化。大鼠学习记忆能力测试在Y迷宫系统中进行。实验结束后处死实验大鼠，检测大脑海马PP1、PP2A蛋白表达、AChAT（胆碱乙酰化酶）、AChE（乙酰胆碱酯酶）活性以及大鼠血清GSH-Px活力。 结果：⑴相同时间点，不同组间TRT比较:第1、2、3、4、31天，模型组、智三针组都大于正常组(P＜0.05);第31天，智三针组小于模型组(P＜0.05)。同一组别，不同时间点TRT比较:(1)模型组第1天与第2、3、4、31天比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，第2、3、4、31天两两比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(2)正常组第1天与第2天比较，差异无统计学意义(P＞0.05);与第3、4、31天比较，差异有统计学意义(P＜=0.05);第2天与第3、4天比较，差异无统计学意义(P＞0.05);与第31天比较，差异有统计学意义(P＜=0.05);第3、4、31天两两比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(3)智三针组第1天与第2、3、4、31天比较，差异有统计学意义(P＜=0.05);第2天与第3、4天比较，差异无统计学意义(P＞0.05);与第31天比较，差异有统计学意义(P＜=0.05)。⑵免疫组织化学检测研究表明，与正常组大鼠比较，模型组大鼠大脑海马的PP1、PP2A蛋白表达均显著降低，经过智三针干预PP1、PP2A蛋白表达均显著上升，但跟正常大鼠比较还有显著差异。⑶与正常组大鼠比较，模型组大鼠大脑海马的ChAT、AchE活性均显著降低，经过智三针干预ChAT、AchE活性均显著上升，但跟正常组的大鼠比较还有显著差异，而与非穴位组的大鼠的ChAT、AchE活性进行比较，差异显著。⑷模型组、非穴位组及智三针组大鼠血清的GSH-Px活力较正常组均显著降低，经统计学分析，差异有极显著性(P＜0.001)，智三针组与模型组外周血清GSH-Px活力比较，经统计学分析，差异有极显著性(P＜0.01)，非穴组与智三针组外周血清GSH-Px活力比较，经统计学分析，差异有极显著性(P＜0.01)。 结论：①智三针干预治疗AD模型大鼠可以减少全天总反应时间(TRT)，且TRT明显较模型组和非穴位组缩短，差异均有统计学意义，表明智三针可以改善AD大鼠的学习记忆功能。②智三针干预AD模型大鼠可能是通过升高大鼠大脑海马的PP1、PP2A蛋白表达起作用的。③智三针对AD大鼠模型的治疗作用可能是通过增强大鼠脑内ChAT、AchE活性而产生的，针刺治疗可以使AD模型大鼠脑组织乙酰胆碱含量增高，ChAT、AchE活性增强，使AD大鼠中枢胆碱能神经系统处于活跃状态。通过“智三针”治疗，AD模型大鼠脑组织内乙酰胆碱合成和释放降解速度加快，利用率显著提升，脑组织乙酰胆碱含量得到提高。④智三针能阻抑氧自由基对模型大鼠神经系统的氧化性损伤，起保护性作用。
老年性痴呆;中医治疗;智三针疗法;疗效分析
广州中医药大学
博士
针灸推拿学
许能贵
2015
中文
R749.16;R245.3
64
2015-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）