枳实与枳壳对燥结便秘小鼠的谱效学评价
目的: 研究枳实与枳壳化学成分的差异，以及枳实与枳壳在治疗燥结便秘小鼠时的药效差异;分析造成枳实与枳壳药效差异可能相关的化学成分，探究造成枳实与枳壳“同源异药”可能的物质基础. 方法: 1.建立枳实水煎液与枳壳水煎液的高效液相指纹图谱，选取十批不同产地的枳实和十批不同产地的枳壳，采用相似度比较、聚类分析和主成分分析等统计学方法，比较枳实与枳壳的化学成分差异，分析造成此种差异的可能的相关成分. 2.采用星点设计-效应面法，优化了枳实、枳壳总黄酮在利用大孔树脂进行富集方面的方法. 3.采用对小鼠禁水72h，期间喂食干燥大米的方法，模拟“燥结便秘”模型，将枳实水煎液、枳壳水煎液、枳实总黄酮部分、枳壳总黄酮部分、枳实挥发油部分和枳壳挥发油部分分别灌胃8天，通过比对各药效指标，评价枳实、枳壳各组分的药效作用. 4.采用皮尔逊相关分析和灰色关联度分析等统计方法将药效指标与指纹图谱结合，分析造成枳实与枳壳药效差异的可能物质来源. 结果: 1.建立了枳实与枳壳的高效液相指纹图谱，其中枳实选取了特征峰17个，枳壳选取特征峰为18个，从而直观的比较枳实与枳壳的化学成分上的异同点.十批不同产地的枳实之间的指纹图谱相似度较好(＞0.9)，十批不同产地的枳壳的指纹图谱之间的差异较大.将二十批枳实与枳壳指纹图谱结进行聚类分析，发现枳实与枳壳虽来源于同种植物，但品种上并无交叉重叠的情况.继而采用主成分分析法，发现可能造成枳实与枳壳品种差异的主要化学成分有:P1（辛弗林），P2(成分未知，RT43.484min)，P4(成分未知，RT47.897min)，P7（新橙皮苷），P8(成分未知，RT67.379min)，P10(成分未知，RT95.185min). 2.优化了大孔树脂富集枳实总黄酮的工艺:大孔树脂径高比为1∶8，上样浓度为3.5mg·ml-1，上样液pH值为6.00，上样体积18ml，吸附时间为77min，除杂用水体积为30ml，乙醇浓度为88％，洗脱用量为72ml.优化了大孔树脂优化枳壳总黄酮的工艺:大孔树脂径高比为1∶23，上样浓度为5.3mg·ml-1，上样液pH值为6.00，上样体积40ml，吸附时间为53min，除杂用水体积为100ml，乙醇浓度为74％，洗脱用量为124ml. 3.在对“燥结便秘”小鼠模型的给药观察中发现，与正常组、模型组相比较，枳实水煎液的作用明显优于枳壳水煎液;枳实各组分作用均强于枳壳同类组分，并且枳实水煎液的疗效优于枳实其他组分. 4.通过皮尔逊相关分析，枳实药效作用的可能相关物质为:P3(成分未知，RT43.195min)，P5（柚皮苷），P8(成分未知，RT53.879min)，P9（新橙皮苷），P11(成分未知，RT67.388min)，P13(成分未知，RT95.189min);枳壳药效作用的可能相关物质为:P3(成分未知，RT46.597min)，P4（芸香柚皮苷），P6（橙皮苷），P7（新橙皮苷），P13(成分未知，RT95.188min)，P14（柠檬苦素）.通过灰色关联度分析，枳实中与药效相关的可能成分有:P3(成分未知，RT43.195min)，P5（芸香柚皮苷），P6（柚皮苷），P8(成分未知，RT53.879min) P9（新橙皮苷），P11(成分未知，RT67.388min)，P13(成分未知，RT95.186min)和P14（柠檬苦素）;枳壳中与药效相关的可能成分有:P1（辛弗林），P2(成分未知，RT43.434min)，P4（芸香柚皮苷），P5（柚皮苷），P6（橙皮苷），P7（新橙皮苷），P8(成分未知，RT59.314min)，P9(成分未知，RT67.37min)，P10(成分未知，RT68.626min)，P11(成分未知，RT79.991min)，P12(成分未知，RT89.35min)，P13(成分未知，RT95.188min)，P14（柠檬苦素），P15(成分未知，RT105.869min)，P17(成分未知，RT109.274min)，P18(成分未知，RT111.572min). 结论:枳实、枳壳化学成分的组成与含量有差异，且这种差异可能是有几种成分共同造成的.在药效方面，枳实水煎液的作用强于枳壳，且水煎液的作用强于枳实的其他组分.将药效与指纹图谱综合分析，两者的药效物质不完全相同.推测枳实与枳壳的差异是由多种成分共同作用造成的，因此，在对他们进行质量评价时，不应仅检测某一种单一的成分.
枳实;枳壳水煎液;燥结便秘;药效学评价;指纹图谱
广州中医药大学
硕士
中药学
曾元儿
2015
中文
R285.5;R256.35
68
2015-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）