柚皮素混合胶束体系的构建及其体内外评价
柚皮素(naringenin，NAR)为柚皮苷的苷元，属于天然黄酮类，主要存在于葡萄柚中。具有广泛的药理作用与生理活性，如抗菌、抗炎、抗氧化、止咳祛痰、降血脂、抗癌抗肿瘤、解痉和利胆等。然而，NAR作为黄酮类组分其水溶性较差，进而导致其生物利用度不高，使其临床应用受限。本文通过两种制剂学手段:高压均质法制备磷脂/十聚甘油单月桂酸酯二元混合胶束(phospholipidspolyglyceryl-10 laurate binary mixed micelles，BMM)和薄膜水化法制备磷脂/胆盐/聚维酮K30三元混合纳米胶束(phospholipids-bile salt-PVP K30 ternary mixedmicelles，TMM)，并将这两种胶束体系包载柚皮素得到两种柚皮素载药胶束，即柚皮素二元混合纳米胶束(NAR-BMM)与柚皮素三元混合纳米胶束(NAR-TMM)，以提高柚皮素的溶解度与口服生物利用度，为柚皮素给药系统的开发提供理论基础。全文主要分为以下六个部分: 第一章综述 本章对NAR的药理作用与理化性质进行简要的说明，对其现有的各种新剂型，如复合物包合物、纳米粒、固体分散体、自微乳等进行总结与归纳。此外，对胶束的发展概况进行了简要的阐述，着重介绍了本文所研究的磷脂-十聚甘油单月桂酸酯二元混合胶束与磷脂/胆盐/聚维酮三元纳米胶束。本章就以上几个方面的研究进展进行综述，为本课题的后续研究做铺垫。 第二章处方前研究 本章建立了高效液相色谱(HPLC)法对NAR-BMM和NAR-TMM中的药物含量进行检测与定量，并考察了室温下NAR在不同pH（1.2、4.5和7.4）介质和纯水中的溶解度，结果显示pH7.4时所测得的溶解度最大，但也仅为(41.62±0.36)μg·mL-1，说明NAR是难溶性药物。 第三章柚皮素/磷脂/十聚甘油单月桂酸酯二元混合胶束的制备与体外评价 本章采用高压均质法制备磷脂/十聚甘油单月桂酸酯二元混合胶束，并以该技术制备柚皮素的柚皮素二元混合胶束(NAR-BMM)。以透光率和包封率为主要指标，利用单因素实验初步筛选NAR-BMM的制备处方与工艺，再利用正交实验优化出具有最佳包封率与载药量的NAR-BMM制备工艺与处方为:投药量为2 mg·mL-1，辅料总量为30 mg·mL-1，磷脂(PL)与十聚甘油单月桂酸酯(polyglyceryl-10 laurate，PG-10L)的质量比是1∶1，搅拌温度为60℃，均质压力为500 bar，循环3次。验证实验表明该处方工艺下NAR-BMM包封率最高，可达82.5％，载药量为5.16％。 对NAR-BMM体系的体外性状进行评价，结果表明，该体系制备的载药胶束均匀透明、流动性好，其粒径为（37.73±0.88）nm，多分散系数为（0.06±0.01），Zeta电位为-（14.8±0.94）mV。体外释药实验显示:NAR-BMM在三种不同pH介质中的释放速率与72 h的累计释放量均显著高于柚皮素原料药，表明NAR-BMM体系可显著提高柚皮素的溶解度。但热稳定性实验显示:含药量为4mg·mL-1的NAR-BMM在（55±5）℃条件下，静置一个月后，其包封率与粒径均出现显著的变化，且有絮状物析出，振摇后可分散均匀，说明高含量的NAR-BMM体系热稳定性较差。 第四章柚皮素/磷脂/胆盐/聚维酮三元纳米载药胶束的制备及体外评价 本章采用薄膜水化法制备磷脂/胆盐/聚维酮三元纳米混合胶束，并以此胶束技术制备NAR三元混合载药胶束(NAR-TMM)。通过单因素实验与正交实验对影响NAR-TMM包封率与载药量的主要因素进行考察，最后得到NAR-TMM的最佳处方为:辅料总投量为1000mg，磷脂与胆酸钠的质量比为4∶3，聚维酮K30(PVP K30)投量为300mg，投药量为40 mg，水化体积为10 mL。以该工艺制备的NAR-TMM包封率最高可达87.56％，载药量为3.37％。 通过透射电镜(TEM)和Brookharen动态光散射激光粒度分析仪考察NAR-TMM的形态、粒径和Zeta电位，结果显示:NAR-TMM为均匀分散的球形粒子，其粒径为(41.5±0.3)nm，Zeta电位为-（24.3±0.64）mV。体外释药试验表明NAR-TMM可以显著改善NAR的溶解度与释放速率，4h时NAR-TMM在双蒸水内的累积释药率达到95％以上。此外，通过对该体系进行热稳定实验证明NAR-TMM体系具有良好的热稳定。 第五章柚皮素及其制剂的体内分析方法的建立 本章建立HPLC法测定大鼠血浆和小鼠组织样品中柚皮素含量的体内分析方法，以直接沉蛋白法与酶解法分别测定血浆中游离柚皮素的含量(C)和血浆中柚皮素的总量(C')，以萃取法处理血浆与组织样品，流动相均为30％的乙腈磷酸盐缓冲液（以磷酸调节pH至1.2），Symmetry C18色谱柱，柱温为30℃，进样量为20μL，检测波长为288 nm，对该体内分析方法进行了方法学的验证，结果表明，该分析方法具有较强的专属性，回收率、精密度与稳定性等指标均符合体内药物分析的要求。 第六章柚皮素混合胶束体系药动学及组织分布研究 本章以SD大鼠为动物模型，单次口服90 mg·kg-1的NAR原料药、NAR-TMM和NAR-BMM，并分别对药物在血浆中游离柚皮素的浓度(C)与血浆中总柚皮素浓度(C')进行检测，利用药动学软件BAPP2.3计算相关药动学参数。SD大鼠单次口服给药后的血浆中游离NAR浓度测定结果显示，原料药、NAR-BMM和NAR-TMM的AUC0-48分别为2745.57、15004.41和18815.45 h·ng·mL-1;而血浆中总NAR浓度测定结果显示，原料药、NAR-BMM和NAR-TMM的AUC'0-48分别为16324.83、139130.23和242982.58 h·ng·mL-1。此时，NAR-BMM和NAR-TMM相对于NAR的生物利用度Fr与F'r分别为546.50％、685.30％与852.26％、1488.42％。说明所制备的两种制剂均显著提高了柚皮素的生物利用度，且NAR-TMM较NAR-BMM的增幅更大，这可能与之较好的稳定性有关。 本章还通过考察给药后NAR原料药、NAR-TMM在小鼠组织中的分布情况，发现柚皮素主要集中于小鼠的肺、肝和心等部位，在脑中分布极少，而NAR-TMM也可显著增加柚皮素在各组织中的量，这说明NAR-TMM可提高NAR在组织中的量，减少NAR以原型被直接排除体外的量。
柚皮素;混合胶束体系;高压均质法;薄膜水化法;溶解度;生物利用度
江苏大学
硕士
药剂学
徐希明
2015
中文
TQ461
90
2015-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）