脂氧素A4在椎间盘突出所致大鼠根性神经痛中的作用及机制研究
背景： 根性神经痛是椎间盘突出症最常见的症状，疼痛剧烈，迁延难愈，极大的影响患者的生活质量。研究表明，除机械压迫因素外，突出髓核(Nucleus Pulposus，NP)组织与神经根非压迫性接触所诱发的炎症反应也是根性神经痛的重要原因，是近年来备受关注的医学热点。髓核的致炎特性是诱发非压迫致痛的重要机制。髓核作为“隔离抗原”存在，一旦突出暴露于免疫系统，即可激发机体自身免疫反应，导致炎症反应，中性粒细胞、单核巨噬细胞等炎性细胞募集、增殖，释放各种溶酶、炎症细胞因子（如IL-1β、IL-6、TNF-α、前列腺素等），引起神经根肿胀，空泡变性，从而导致根性神经痛。 脂氧素(lipoxins，LXs)是体内重要的内源性促炎症消退介质，为炎症反应的重要“刹车信号”，是花生四烯酸在脂加氧酶的作用下通过跨细胞途径合成，对多种炎症细胞和炎症因子有显著的负性调节作用。目前脂氧素促进炎症消退的作用已在急性肺损伤、哮喘、肾纤维化等疾病中得到证实，然而却很少有研究涉及其在椎间盘突出症所致根性神经痛中的作用。本研究拟通过建立非压迫性椎间盘突出症大鼠模型，通过鞘内给药的方式探讨脂氧素在根性神经痛中的作用及机制。 目的： 本研究拟通过建立非压迫性椎间盘突出症大鼠模型，通过鞘内给药的方式探讨脂氧素A4在根性神经痛中的作用及机制。 方法： 1.建立大鼠非压迫性椎间盘突出症模型，并于术后连续3天鞘内注射脂氧素A4或生理盐水10μl。根据实验条件不同，将72只大鼠随机分为4组:假手术组（假手术+10μl生理盐水）、模型组（模型+10μl生理盐水）、脂氧素A410ng组（模型+10 ng脂氧素A4）、脂氧素A4100ng组（模型+100 ng脂氧素A4），每组18只。 2.于术前1天及术后7天连续观察大鼠行为学变化并测定术侧机械痛50％PWT。然后处死大鼠取术侧脊髓背角(L4-L6)，分别利用ELISA和PCR技术检测脊髓背角炎性因子（TNF-α、IL-1β、TGF-β1和IL-10）的表达。此外，采用Western blot检测术侧脊髓背角NF-κB/p65和MAPK(ERK、JNK和P38)蛋白通路的表达。 结果： 与假手术组比较，模型组大鼠的50％PWT明显降低(p＜0.05);与模型组比较，脂氧素A410ng组和脂氧素A4100ng组术后各观测点50％PWT明显升高(p＜0.05)。与假手术组比较，模型组TNF-α、IL-1β的蛋白和mRNA含量明显升高而TGF-β1的蛋白和mRNA含量明显降低(p＜0.05)，IL-10的蛋白含量明显降低(p＜0.05);与模型组比较，脂氧素A410ng组和脂氧素A4100ng组TNF-α、IL-1β的蛋白和mRNA含量明显降低而TGF-β1的蛋白和mRNA含量明显升高(P＜0.05)，IL-10的蛋白含量明显升高(p＜0.05)，且呈剂量依赖性。与假手术组比较，模型组NF-κB/p65，p-ERK， p-JNK和p-p38水平明显升高(p＜0.05);与模型组比较，脂氧素A410ng组和脂氧素A4100ng组NF-κB/p65，p-ERK和p-JNK水平明显降低(p＜0.05)，且呈剂量依懒性，但p-p38水平无明显变化(p＞0.05)。 结论： 鞘内注射脂氧素A4能够减轻非压迫性椎间盘突出症大鼠的根性神经痛，其机制可能与抑制NF-κB/p65、ERK和JNK的活性并下调促炎因子(TNF-α和IL-1β)和上调抗炎因子(TGF-β1和IL-10)的表达有关。因此，脂氧素A4为椎间盘突出症的治疗提供新的思路和实验依据。
根性神经痛;脂氧素A4;药理作用;椎间盘突出
山东大学
硕士
麻醉学
孙涛;傅志俭
2015
中文
R971;R744.2
56
2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）