草莓耐寒性状分子标记分析
草莓(Fragaria ananassa Duch.)属蔷薇科草莓属，是我国普遍栽培的兼具高营养价值和经济价值的水果。在实际栽培中，特别是北方严寒季节，设施结构一般相对简单，低温是影响草莓产量和品质的主要因素之一。本试验以合肥地区主栽草莓10个品种的叶片为试材，进行0℃，-2℃，-4℃，-6℃，-8℃，5个温度梯度的低温处理，计算出10个草莓材料的半致死温度(LT50)，然后与冷害指数作相关分析，确定各个草莓品种耐寒能力的强弱;运用单因素试验设计方法，对影响草莓SRAP反应体系的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物浓度以及模板DNA浓度和退火温度等因素进行优化，建立适宜草莓SRAP-PCR反应体系;从110对引物中筛选出55对多态性好、条带清晰稳定的引物对，对其进行统计分析、构建聚类树型图，对与草莓耐寒相关的SRAP标记作初步研究，为草莓选育耐寒品种奠定基础。本试验获得的主要结果如下: (1)不同低温胁迫下，各个草莓品种的电解质渗透率均随着温度降低而增大，处理温度与电解质渗透率之间呈负相关。依据半致死温度的大小对10个草莓品种的耐寒性进行排序，得出:“丰香”＞“红颜”＞“雪妹”＞“二码沃”＞“佐贺清香”＞“宁丰”＞“法兰地”＞“枥乙女”＞“京承香”＞“章姬”，且各个品种的半致死温度依次为:-5.32℃、-4.74℃、-4.24℃、-3.89℃、-3.88℃、-3.09℃、-2.97℃、-2.43℃、-2.19℃、-1.70℃。 (2)冷害指数统计得出，10个品种的冷害指数在50％～90％之间，与半致死温度作相关分析，得出相关系数为0.735，达显著水平。 (3)用改良的CTAB法成功提取了高质量的草莓基因组DNA，其OD260/OD280值基本在1.7-2.0之间，琼脂糖电泳检测结果也表明提取的DNA纯度较好，无明显蛋白质等污染。 (4)对草莓SRAP-PCR反应体系进行优化，建立了适宜草莓SRAP-PCR反应体系:20μl的反应体系中含10×PCR buffer2μl， Mg2+2.0mmol/L，dNTPs0.3mmol/L，正反向引物各为0.6μmol/L，TaqDNA聚合酶1.0U，模板DNA为100ng。 (5)从110对SRAP引物筛选出条带丰富清晰、多态性较好的引物对共55对，占总引物对的50％。共扩增出311条多态性条带，平均多态率为73.43％。多态性信息含量（PIC值）在0.9001～0.2688之间，平均PIC值为0.6993。聚类分析结果显示，10个草莓品种可分为3个大类，其中耐寒性最弱的“章姬”单独聚成一类，而耐寒性较强的“丰香”、“雪妹”等聚在第三大类的第一亚类中，说明运用SRAP分子标记可以对草莓耐寒性研究提供一定的参考作用。
草莓;分子标记;耐寒性;聚类分析
安徽农业大学
硕士
蔬菜学
朱世东
2014
中文
S668.4
52
2015-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）