外源性NGAL对脓毒症大鼠急性肾损伤的肾保护作用及机制
目的:探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对大鼠脓毒症急性肾损伤有无保护作用及其相关机制。 方法:通过盲肠结扎穿孔法制备经典脓毒症大鼠急性肾损伤模型(CLP)，将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组（A组）、CLP+生理盐水（B组）、CLP+NGAL（C组），每组10只。取造模前(0h)、造模后24h大鼠静脉血，用于检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;造模24h后处死所有大鼠，取右侧肾组织制作病理切片，采用苏木精-伊红(H-E)染色，观察肾脏形态学变化;免疫组织化学染色检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达;末端转移酶标记技术（TUNEL）染色观察肾组织内细胞凋亡的情况。取左侧肾组织制备组织匀浆，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脂质氧化产物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。 结果:组内比较，B、C组24h肌酐及尿素氮水平较0h升高明显，P＜0.05;组间比较，B、C组24h的肌酐及尿素氮水平较A组升高明显，P＜0.05，C组肌酐及尿素氮升高水平明显低于B组，P＜0.05。H-E染色观察下，B组肾损伤最明显，C组肾损伤情况较B组明显减轻。免疫组化结果显示A组Caspase-3和Bax蛋白阳性表达率分别为（0.43±0.25）％、（1.37±1.1）％，C组分别为（7.32±2.04）％、(22.26±2.20)％，均显著低于B组的(20.33±2.01)％、(49.2±8.55)％。TUNEL染色见A组肾脏组织偶见凋亡细胞，C组13.6±3.42个/高倍镜视野，显著低于B组的26.4±7.2个/高倍镜视野(P＜0.05)。ELISA检测结果显示，A组及C组MDA含量明显低于B组(P＜0.05)，C组SOD含量明显高于B组(P＜0.05)。 结论:外源性NGAL可能通过抑制Caspase-3的激活，降低促凋亡蛋白Bax的水平，减少细胞凋亡，同时抑制脂质氧化，减轻组织损伤，起到保护肾脏的作用。
脂质运载蛋白;脓毒症;急性肾损伤;肾保护作用;动物模型
中南大学
硕士
临床医学
赵双平
2014
中文
R692;R965.2
46
2015-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）