CREB3对结直肠癌转移的影响及其机制
背景:结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)患者的死亡率很高，而转移是结直肠癌患者死亡的主要原因。目前没有任何测试或生物标志物能精确地预测肿瘤的侵袭和转移。因此，提高预测侵袭转移的手段是十分有必要的，鉴定生物标志物，监测结直肠癌的转移将使医疗个性化，提高癌症患者的存活率。CREB3(也称Luman或LZIP)是CREB3亚家族转录因子的原型，是一种bZIP转录因子，它不仅参与了内质网应激和未折叠蛋白反应，而且还在许多生物学过程，包括细胞迁移以及癌变中起到至关重要的作用。CREB3能与转录共激活子HCF1，丙型肝炎病毒核心蛋白，CC趋化因子受体，和树突状细胞特异性跨膜蛋白相互作用。还有研究指出CREB3可能与乳腺癌细胞、宫颈癌细胞的转移密切相关。本实验旨在研究与结直肠癌浸润转移相关的生物标志物，提高预测结直肠癌侵袭转移的手段。 方法:(1)用表达谱芯片检测结直肠癌FFPE组织中mRNA表达谱的差异。(2)采用原位杂交技术和免疫组织化学技术对芯片结果进行验证。(3)QPCR检测三株结直肠癌细胞（分别为HCT116、SW620和SW480）中CREB3的表达。(4) Transwell法检测三株结直肠癌细胞的迁移能力。(5)免疫细胞化学对SW480细胞中的CREB3进行定位。(6) QPCR法检测三株结直肠癌细胞中转移相关基因的表达如:TWIST1、β-catenin、MMP9和MMP2。(7)siRNA法瞬时干扰SW480细胞中的CREB3后，QPCR检测转移相关基因(TWIST1、β-catenin、MMP9、MMP2)的表达。 结果:(1)芯片结果显示，有远处转移结直肠癌患者的转移癌灶中，CREB3的表达明显高于其原发癌灶;在复发患者的复发癌灶中，CREB3的表达明显高于其原发癌灶。(2)原位杂交技术和免疫组织化学结果显示转移组患者原发灶和癌旁组织中的CREB3表达明显高于无转移组患者的原发灶和癌旁组织。(3) QPCR结果显示三株结直肠癌细胞中SW480细胞中CREB3的表达最高。(4)三株结直肠癌细胞中SW480细胞的迁移能力最强。(5)免疫细胞化学结果显示在SW480细胞中CREB3主要表达在胞浆，少量表达在胞核。(6) QPCR显示三株结直肠癌细胞中与转移相关的几个基因如β-catenin、MMP9和MMP2在SW480细胞中的表达最高，趋势与CREB3相同。(7)瞬时干扰SW480细胞中的CREB3后，QPCR结果显示MMP2的表达显著下降，Twist1、β-catenin和MMP9的表达无明显变化。 结论:CREB3的表达可能与结直肠癌的转移相关，CREB3可能通过MMP2的表达促进结直肠癌细胞的迁移。
结直肠癌;侵袭转移;CREB3转录因子;内质网应激
中南大学
硕士
基础医学
郑长黎
2014
中文
R735.3;R730.21
59
2015-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）