4EGI-1诱导细胞凋亡抑制鼻咽癌细胞增殖活性的分子机制研究
[目的]：鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma，NPC)是中国南方地区最为常见恶性肿瘤之一。目前以放化疗为主的治疗仍不能有效的阻止鼻咽癌的复发、转移。真核细胞翻译起始因子-4E(Eukaryoticinitiation factor4E，eIF4E)为帽状依赖性翻译过程中的限速因子，eIF4E/eIF4G复合物的组装在翻译起始阶段的基因表达调控中起关键性作用。这一复合物受真核翻译起始因子4E结合蛋白(4EBPs)调节，4EBPs与eIF4G竞争性地连结至eIF4E。正常细胞中，非磷酸化状态的4EBPs与eIF4E结合，限制eIF4E/eIF4G复合物的组装，从而抑制帽状依赖性翻译，影响肿瘤相关蛋白质的翻译。小分子化合物4EGI-1能干扰eIF4E/eIF4G的相互作用，有效地增加4EBP1与eIF4E结合，下调eIF4E调控的翻译起始依赖性肿瘤相关蛋白的表达，抑制肿瘤细胞生长和诱导细胞凋亡。我们前期研究发现4EGI-1具有增加DR5蛋白表达和下调c-FLIP蛋白表达，增加肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand，TRAIL)诱导肺癌细胞凋亡发挥抗肿瘤作用的功能。但未见4EGI-1在鼻咽癌中的研究报道。基于上述前期研究结果，我们研究4EGI-1对鼻咽癌细胞增殖活性的影响，探讨4EGI-1在鼻咽癌中作用的具体分子机制;分析DR4和DR5蛋白表达与鼻咽癌临床病理特征的相关性，为鼻咽癌的靶向治疗和分子靶标的研究提供科学依据和理论基础。 [方法]：(1)不同浓度的4EGI-1处理鼻咽癌细胞，流式细胞学检测鼻咽癌细胞凋亡率，Western blotting检测c-PARP、Caspase-8、DR5、HIF-1a、p-4EBP1和DR4蛋白的表达，平板克隆形成检测4EGI-1对鼻咽癌细胞的放疗增敏效果。(2)免疫组化检测DR4和DR5在鼻咽癌组织中的蛋白表达水平。 [结果]：(1)4EGI-1诱导鼻咽癌细胞凋亡，显著抑制鼻咽癌的增殖活性;(2)4EGI-1增加鼻咽癌细胞c-PARP、Caspase8、DR5和HIF-1a蛋白的表达，降低p-4EBP1和DR4蛋白表达;(3)4EGI-1增加2Gy和4Gy放射剂量治疗鼻咽癌细胞的疗效，增敏比为1.195;(4)临床Ⅲ-Ⅳ期鼻咽癌组织中DR5蛋白表达显著低于临床Ⅰ-Ⅱ期鼻咽癌。(5)伴有淋巴结转移的鼻咽癌组织中DR5蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移者，鼻咽癌转移灶的DR5阳性表达也显著低于与其匹配的原发鼻咽癌。(6)多因素回归分析结果也显示DR5蛋白表达与鼻咽癌淋巴结转移状况显著相关。 [结论]：1、4EGI-1诱导鼻咽癌细胞凋亡抑制鼻咽癌细胞的增殖活性;4EGI-1增加放射治疗鼻咽癌细胞的疗效。2、4EGI-1促进鼻咽癌细胞过表达DR5，c-PARP和Caspase8，通过激活死亡受体通路诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。3、DR5蛋白表达降低促进鼻咽癌淋巴结转移和鼻咽癌患者的临床进展;DR5蛋白表达可作为评估鼻咽癌淋巴结转移和治疗的分子标志物。我们的研究结果为类似4EGI-1结构的抗鼻咽癌的靶向药物研究提供科学依据和理论基础。
鼻咽癌;4EGI-1细胞;细胞增殖;分子机制;临床治疗
中南大学
硕士
基础医学
范松青
2014
中文
R739.63;R730.2
65
2015-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）