香莓化学成分及其活性的研究
香莓(Rubus pungens var.oldhamii)为悬钩子属植物之一，该属植物多为药用植物。近年来，国内外许多学者对本属植物进行了一系列化学成分和药理活性研究，发现悬钩子属植物含有多种化学成分，包括黄酮、挥发油、鞣质、萜类、酚类等多种成分，其中很多成分具有抗氧化、抑菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性，药用价值很高，对调节机体的生命活动及医疗保健作用有重要意义。然而，作为该属植物的香莓，对其生物活性及活性成分的研究甚少，也没有对其进行充分开发利用。本研究旨在利用野生香莓资源，对其化学成分进行提取分离，并对其主要生物活性进行研究。以期进一步利用野生资源量大、利用率低的香莓作为原料，能够提取得到抑菌、抗氧化等生物活性物质，为开发香莓源食品防腐剂、抗氧化剂等提供理论依据，从而大大增加香莓的利用率，实现资源的充分利用。本研究结果总结如下: 化学成分的系统预试验发现香莓中主要含有糖类、酚类、黄酮、萜类、鞣质等成分，此外，还含有部分挥发油类成分。活性研究表明香莓提取物能够抑制部分食品腐败菌。60％乙醇提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有较好的抑菌效果，最低抑菌浓度(MIC)分别为6.25mg/mL、12.5mg/mL、12.5mg/mL。此外，香莓提取物还具有较好的抗氧化能力。在浓度为50mg/mL时，香莓乙醇提取液及水提液对DPPH自由基均有一定的清除效果，水提液的清除率为69.67％，乙醇提取液的清除率达到83.02％。 采用响应面分析法并基于Box-Behnken试验设计，以提取温度、提取时间、乙醇浓度为因变量，以香莓提取物抗氧化活性为响应值，对香莓抗氧化活性成分提取工艺参数进行优化。响应面试验结果表明，提取时间、乙醇浓度对响应值都有显著影响。结合生产实际，得到最佳工艺条件为，提取温度80℃、提取时间85min、乙醇浓度65％。在此条件下的抗氧化活性预测值为214.64mg/g·DW，与实测值之间吻合良好，表明该模型对香莓抗氧化活性成分提取具有一定的实际指导意义。 用有机溶剂萃取法对粗提物进行萃取，通过对不同溶剂萃取物抗氧化活性的测定并综合考虑以乙酸乙酯为萃取溶剂。对乙酸乙酯萃取物通过硅胶柱层析分离得到167个馏分，经薄层层析试验检测合并，得到F1-F19部分，同时经过二苯基苦基苯肼基(DPPH)自由基的纯甲醇溶液显色后，发现F3-F16组分含有抗氧化活性物质。并且由不同分离组分(F3-16)对DPPH自由基清除能力比较发现，分离组分(F3、6、12-16)对DPPH自由基清除活性较高。其中组分F16的抗氧化活性最高，对DPPH自由基清除活性的IC50值为12.54μg/mL，介于Vc的IC50值(11.30μg/mL)与BHA的IC50值(14.90μg/mL)之间。 通过柱层析色谱法对抗氧化组分进行分离纯化，组分F6由小硅胶柱(1.0×25cm)层析分离纯化得到化合物A，组分F16经Sephadex LH-20凝胶柱(1.5×55cm)层析及制备型液相分离纯化得到化合物B。根据化合物的1H-NMR、13C-NMR谱图的综合解析，并与文献报道数据比对，发现化合物A为邻羟基苯甲酸，化合物B为邻苯二甲酸二丁酯。其中邻羟基苯甲酸具有一定的抗氧化活性，对O2-·清除率的IC50值分别为420.56μg/mL，较BHA好。
香莓;药用植物;分离纯化;化学成分分析;药理活性
浙江师范大学
硕士
植物学(植物生物技术)
徐丽珊
2014
中文
R284.1;R282.710.3
84
2015-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）