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摘要
英文摘要
目录
第1章引言
第2章实验材料
2．1 家系及样本
2．2 试剂
2．2．1 酚／氯仿法提取外周血基因组DNA试剂
2．2．2 PCR试剂
2．2．3 DHPLC试剂
2．2．4 PCR产物纯化试剂
2．2．5 电泳试剂
2．2．6 重亚硫酸氢钠处理DNA所用试剂
2．2．7 全基因组DNA甲基化检测试剂
2．3 仪器
2．4 软件
第3章实验方法
3．1 本研究所采用的技术路线
3．2 健康女性样本的筛选
3．2．1 NBT法检测G6PD活性
3．2．2 酚／氯仿法提取外周血基因组DNA
3．2．3 DNA浓度和纯度的测定
3．2．4 PE／HPLC检测G6PD基因型
3．3 全基因组DNA甲基化的定量检测
3．3．1 HpaⅡ／MspⅠ结合荧光偏振法(FPDM)全基因组甲基化检测原理
3．3．2 HpaⅡ／MspⅠ结合荧光偏振法(FPDM)全基因组甲基化检测实验步骤
3．4 G6PD启动子区CpG位点甲基化的定量检测
3．4．1 重亚硫酸氢钠处理DNA后测序法检测CpG甲基化原理
3．4．2 重亚硫酸氢钠处理DNA后测序法检测CpG甲基化实验步骤
3．5 X染色体失活类型检测
3．5．1 基于人雄激素受体基因CAG多态性分析x染色体失活类型的检测原理
3．5．2 基于人雄激素受体基因CAG多态性分析x染色体失活类型的检测步骤
3．6 统计学处理
第4章实验结果
4．1 健康女性样本的筛选结果
4．2 全基因组DNA甲基化的定量结果
4．2．1 不同年龄段健康女性的全基因组甲基化水平比较
4．2．2 G6PD酶缺乏的女性杂合子与酶正常的女性杂合子的全基因组甲基化水平比较
4．3 G6PD启动子区甲基化的检测结果
4．3．1 G6PD启动子区CpG位点的选择
4．3．2 不同年龄段健康女性的G6PD启动子区甲基化水平比较
4．3．3 G6PD酶缺乏的女性杂合子与酶正常的女性杂合子的G6PD启动子区甲基化水平比较
4．4 X染色体失活类型的检测结果
4．4．1 AR基因STR实际杂合度统计
4．4．2 对照组、酶正常杂合子与酶缺乏杂合子的X染色体失活类型的分布状态的比较
4．4．3 X染色体失活类型与G6PD缺乏症女性杂合子表型之间的关系
第5章分析与讨论
5．1 DNA甲基化值与年龄之间的关系
5．2 DNA甲基化值与G6PD活性的关系
5．3 X染色体失活程度与G6PD活性的关系
5．4 本研究的优点与不足
第6章结论
参考文献
中英文缩略词表
致谢
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