MIF和VEGF-C在人正常乳腺细胞和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中的表达及意义
目的:研究在人正常乳腺细胞(HCC1937)和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIF和VEGF-C的表达情况，分析MIF在乳腺癌细胞和人正常细胞中的表达差异;VEGF-C在乳腺癌细胞和人正常细胞中的表达差异，并分析MIF和VEGF-C在乳腺癌组织中及正常乳腺组织中表达的相关性。 方法:体外培养人正常乳腺细胞(HCC1937)和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞。提取各培养组细胞内总蛋白后，用Western blot检测人正常乳腺细胞(HCC1937)和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIF和VEGF-C蛋白的表达量;提取各培养组细胞内的总mRNA，并运用RT-PCR检测人正常乳腺细胞(HCC1937)和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIF和VEGF-CmRNA的表达水平。最后对各组细胞中MIF和VEGF-C蛋白和mRNA的表达水平进行统计学分析。 结果:通过运用Western blot检测方法检测其中MIF和VEGF-C蛋白的表达，以β-actin为内参对结果进行校正，发现在正常乳腺细胞(HCC1937)中MIF和VEGF-C蛋白低表达，而在乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIF和VEGF-C蛋白呈高表达状态，结果见图1。运用Image-Pro4.5分析软件测正常乳腺细胞(HCC1937)和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中的β-actin、MIF和VEGF-C蛋白Westernblot条带的灰度值，实验结果取3次实验数据的平均值，统计分析结果用(x)±s表示，表达差异具有统计学意义(P＜0.05，r=0.902)通过蛋白分子检测，我们发现在相比于正常乳腺细胞(HCC1937)，乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIF和VEGF-C蛋白高表达，为了在基因水平验证我们的结论，我们做了RT-PCR来进一步检测在正常乳腺细胞(HCC1937)，乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIFmRNA和VEGF-CmRNA，以β-actin为内参对结果进行校正。通过琼1.0％脂糖电泳，我们发现乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中MIFmRNA和VEGF-CmRNA高表达，在正常乳腺细胞(HCC1937)中MIFmRNA和VEGF-CmRNA低表达见图2，运用Image-Pro4.5分析软件测正常乳腺细胞(HCC1937)和乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中的β-actin、MIF和VEGF-CmRNA条带的光度值，实验结果取3次实验数据的平均值，统计分析结果用(x)±s表示，达差异具有统计学意义(P＜0.05，r=0.817) 结论:MIF和VEGF-C在乳腺癌组织中高表达并呈正相关，但在人正常乳腺细胞(HCC1937)中MIF和VEGF-C呈低表达。在MIF和VEGF-C之间可能存在某种调控机制，促进其在乳腺癌中过表达，进一步研究其间的调控机制对于乳腺癌患者的治疗及癌转移的预防具有重要作用。
巨噬细胞移动抑制因子;血管内皮生长因子;临床病理;乳腺癌;调控机制
桂林医学院
硕士
外科学
洪勇
2014
中文
R737.9
47
2014-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）