绵羊卵母细胞及体外早期胚胎中nNOS、eNOS、iNOS的表达
一氧化氮(Nitric oxide，NO)作为一种具有自由基性质的多功能活性分子，在体内多种信号传递中起重要作用。体内的NO主要由一氧化氮合酶(NOS)催化产生，现已确认的NOS包含三种亚型:神经型(nNOS)、诱导型(iNOS)、内皮型(eNOS)。由于NO的半衰期非常短而且极不稳定，而NOS是NO产生的限速酶，因此NOS的表达量可以线性反映出NO的生成量。随着对NO的广泛研究，发现其与生殖存在着必不可少的某些联系，特别在动物个体发育的早期。为了了解一氧化氮合酶(NOS)的三个亚型在绵羊卵母细胞体外成熟及早期胚胎中的表达情况，本实验，运用体外培养体系获得未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞及不同发育时期的早期胚胎（2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑葚胚、囊胚），应用实时荧光定量PCR技术检测目标基因nNOS、eNOS、iNOS相对表达情况。结果显示: 1.在绵羊未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和早期胚胎发育各阶段，nNOS、eNOS、iNOS mRNA均有表达。 2.绵羊卵母细胞成熟过程中，nNOS mRNA相对表达量在未成熟卵母细胞期及成熟卵母细胞期均显著高于eNOS、iNOS的表达量(p＜0.05)，并且在成熟卵母细胞中的表达显著高于未成熟卵母细胞(p＜0.05)。 3.早期胚胎发育过程中，nNOS、iNOS mRNA相对表达水平显著高于eNOS的表达(p＜0.05)，并且表达趋势相似，具体呈现出4-细胞期较2-细胞有降低趋势;8-细胞期的表达量显著升高(p＜0.05)并在桑葚胚期达到最高;到囊胚期出现显著降低(p＜0.05)的表达趋势。 研究结果揭示，NO可能参与调控绵羊卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程，尤其在8-细胞期到桑葚胚期这一特定阶段可能具有实质性的生理意义;并且在绵羊卵母细胞成熟过程中的NO可能主要由nNOS介导，而早期胚胎发育过程中的NO可能主要由nNOS和iNOS共同介导调控。
绵羊;一氧化氮合酶;体外培养;卵母细胞;早期胚胎;荧光定量PCR
内蒙古农业大学
硕士
基础兽医学
曹贵方
2014
中文
S858.26
51
2014-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）