对乙酰氨基酚与超氧化物歧化酶、辣根过氧化物酶毒性作用机理的研究
对乙酰氨基酚常被认为是安全的药品，是世界范围内使用最普遍最多的非处方药之一，在临床上应用于普通感冒或者流行性感冒引起的发热等，有明确的用药剂量，在其治疗剂量基础上疗效确切，用药很安全，但目前研究资料显示长期服用、用量过度、混用（例如服药前短期或者长期饮酒）等使用不当等会产生严重的不良反应，肝损害，甚至死亡。目前研究对乙酰氨基酚的毒理学主要集中在细胞和动物实验上，分子水平上研究几乎很少且其具体的毒理学机制尚不清晰，所以在分子水平上研究对乙酰氨基酚进入机体后对生物大分子的毒理性作用，不仅完善其毒理学作用的理论研究，而且为人们更安全的用药提供参考依据。 蛋白质是生命体重要的组成部分，而蛋白酶更是生命活动的重要体现者，例如:超氧化物歧化酶是一类广泛存在于生物体内金属型的氧化还原酶，主要作用是转移和清除体内氧化过程中产生的超氧阴离子自由基，它与过氧化氢酶以及谷胱甘肽过氧化物酶一起构成生物体内三大重要的抗氧化酶。超氧化物歧化酶是世界各国研究热点;过氧化物酶是一类常见的蛋白性质的酶，根据其来源不同可以分为3大类包括，动物过氧化物酶（谷胱甘肽过氧化物酶）、植物过氧化物酶（典型的是辣根过氧化物酶HRP等）、真菌过氧化物酶(木质素过氧化物酶LiP，锰过氧化物酶MnP)，他们都是含有铁卟啉活性中心的血红素蛋白质，催化反应机制类似。而其中HRP是其中研究最广泛之一。 本论文研究了对乙酰氨基酚与功能蛋白酶在分子水平上的毒性作用机理。对乙酰氨基酚进入生命机体后，作为为靶分子的生物大分子超氧化物歧化酶和过氧化物酶相互之间有什么样的毒性作用，从而研究了对乙酰氨基酚对酶蛋白的毒性作用机理。论文的研究内容主要包括以下三个部分: 第一部分:本文的前言部分，阐述了本文主要的研究对象对乙酰氨基酚概况，对近些年国内外关于对乙酰氨基酚的毒理性研究进展进行综述。简述了作为本文研究的生物大分子超氧化物歧化酶和辣根过氧化物酶的概况及研究现状。总结了本文所用到的实验方法技术，提出了本文研究的内容和意义。 第二部分:利用紫外-可见吸收光谱和圆二色谱、荧光光谱等光谱学手段和分子对接技术研究了对乙酰氨基酚和超氧化物歧化酶的结合模式。通过荧光猝灭的现象来计算出热力学参数并判断对乙酰氨基酚与超氧化物歧化酶之间的主要作用力为疏水作用力。二者的紫外吸收光谱与圆二色谱发现对乙酰氨基酚使超氧化物歧化酶所的处微环境发生了变化，超氧化物歧化酶的骨架结构发生改变;对乙酰氨基酚和超氧化物歧化酶结合能使超氧化物歧化酶活性先升高后平稳。 第三部分:利用多种光谱学手段以及分子模拟技术研究了对乙酰氨基酚和辣根过氧化物酶之间的相互作用。实验结果表明，对乙酰氨基酚对辣根过氧化物酶的荧光猝灭作用是通过静态猝灭所导致;对乙酰氨基酚和辣根过氧化物酶之间的主要作用力为疏水作用力;生成的复合物能改变辣根过氧化物酶的二级结构和酪氨酸、色氨酸残基的微环境;AutoDock软件的模拟结果表明对乙酰氨基酚与辣根过氧化物酶在中央空穴处结合。 本论文的研究成果表明，对乙酰氨基酚进入人体后可以改变超氧化物歧化酶和辣根过氧化物酶二级结构，可能对蛋白质的正常生理功能造成影响。丰富了对乙酰氨基酚的毒性或药效作用机理的研究。
对乙酰氨基酚;光谱法;超氧化物歧化酶;辣根过氧化物酶;作用机理
山东大学
硕士
环境工程
刘汝涛
2014
中文
Q554.6
72
2014-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）