从“肠病”大鼠模型肺与结肠组织的病理形态及其VIP、SP、CGRP的表达探讨“肠病及肺”的分子机制
目的 通过观察肠病模型大鼠结肠与肺组织病理形态改变、胃肠功能、肺功能改变及神经肽VIP、SP、CGRP的表达变化，探讨“肠病及肺”的病理传变机制。 方法 取SD大鼠，雄性，共60只。按体重随机分成空白组（24只）和模型组(36只)。所有大鼠常规适应性饲养一周后，模型组大鼠构建TNBS（三硝基苯磺酸）诱导炎症性肠病模型;空白对造组大鼠按上述方法给予等量生理盐水灌肠。首次造模后每隔7天重复上述方法造摸，直至实验结束。实验过程中观察各组大鼠精神、进食、粪便及体重情况。于首次造模后第8天、第29天、第50天处死大鼠，处死前对大鼠进行肺、胃肠功能推进的测定，处死大鼠HE染色后在显微镜下观察结肠、肺、心、肝、脾、肾组织病理形态学改变;电镜观察结肠与肺组织的超微结构改变，用免疫组化法检测结肠与肺组织切片中VIP、SP、CGRP的表达。 结果 1病理形态 光镜:模型组大鼠造摸后第8天结肠组织出现黏膜处灶性糜烂，黏膜下和肌层炎细胞浸润等表现，具有溃疡的病理特征;第29天出现结肠黏膜处灶性糜烂，黏膜下和肌层炎细胞浸润等表现，第50天结肠黏膜出现不典型上皮细胞，黏膜层和黏膜下层可见淋巴细胞和浆细胞浸润、黏膜下小血管增生、可见浆膜层纤维组织增生;模型组大鼠肺支气管出现上皮细胞变性、坏死、脱落、管腔内炎性渗出等表现;模型组大鼠心、肝、脾、肾组织未见病理形态学改变;空白组大鼠结肠、肺、心、肝、脾、肾均未发现病理改变。 电镜:模型组大鼠第8天可见结肠黏膜层消失，仅剩细胞结构轮廓，其内上皮细胞变性坏死;第29天微绒毛部分消失，线粒体明显肿胀，肌层血管内单核细胞增多、红细胞出现;第50天可见结肠组织黏膜上皮细胞空泡、变性、坏死，结肠黏膜层仅剩胶原纤维组织并出现大量细菌，粘膜下细胞固缩、变性、炎细胞崩解;模型组造模第8天肺组织结构线粒体肿胀明显，可见胞核内少量空泡，肺组织内出现红细胞;第29天可见肺毛细血管内单核细胞增多，上皮细胞脱落、丢失，胞核内出现较多空泡;第50天可见肺间质细胞成分变少，血管内皮细胞线粒体明显肿胀，Ⅱ型上皮细胞微绒毛脱失。空白组大鼠肺泡、结肠黏膜均未见病理改变。 2病理生理 肺功能:与空白组比较，模型组大鼠第8天、第29天、第50天呼吸频率无明显变化（P＞0.05），潮气量、每分通气量降低，有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01);与造模第8天比较，模型组大鼠造模后第29、第50天呼吸频率无明显变化，潮气量第29天有差异(P＜0.05)，第50天潮气量和每分通气量有显著性差异(P＜0.01)。 胃肠功能:与空白组比较，模型组大鼠第8天、第29天、第50天胃内残留率明显增加、小肠推进率明显降低，有显著性差异(P＜0.01);与造模第8天组比较，模型组大鼠造模第29天、第50天组胃内残留率增加，有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01);小肠推进率明显降低，有显著性差异（P＜0.01）。 3神经肽 与空白组比较，模型组大鼠第8天结肠组织VIP、SP表达升高(P＜0.01或P＜0.05)，第29天、第50天VIP、SP表达降低(P＜0.01或P＜0.05)，模型组大鼠第8天、第29天、第50天结肠组织CGRP表达升高呈显著性差异(P＜0.01);第8天、第29天、第50天肺组织SP、CGRP表达升高（P＜0.01或P＜0.05)，第8天VIP表达无明显变化(P＞0.05)，第29天、第50天VIP表达升高(P＜0.01或P＜0.05)。 与模型组第8天比较，模型组大鼠第29天、第50天结肠组织VIP、SP表达降低(P＜0.01或P＜0.05)，CGRP表达升高（P＜0.01或P＜0.05）;与模型组第29天比较，第50天肺组织VIP、SP、CGRP表达升高(P＜0.01或P＜0.05)。 结论: 1肠病大鼠可出现肺功能与肺组织病理形态学的改变，提示肠病可能传变到“肺”。 2肠病大鼠在造模后第8天出现肺组织病理形态改变，提示肠病在较短时间内即可传变到“肺”。 3肠病大鼠造模第8天、第29天、第50天结肠组织、肺组织出现病理形态改变，心、肝、脾、肾组织未见病理形态改变，提示结肠与肺具有其特异性。 4初步发现VIP、SP、CGRP等神经肽物质可能是“肠病及肺”传变的部分物质基础，为“肺与大肠相表里”理论提供了现代医学实验依据。
肠病;肺病;结肠组织;肺组织;病理形态;神经肽;基因表达;病理传变机制
成都中医药大学
硕士
中医临床基础
杨宇
2012
中文
R574.62;R228
73
2014-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）