Surfactin对HepG2细胞的抗肿瘤作用研究
本实验将surfactin作用于人肝癌细胞株HepG2，研究surfactin对HepG2细胞增殖的影响以及诱导凋亡的相关机理。 MTT实验表明，surfactin能明显抑制HepG2的增殖，作用24h后，IC50值为42μg/mL;而surfactin对人正常肝细胞L-02没有明显的毒性作用。这说明surfactin能够特异性的诱导HepG2细胞凋亡。 利用HE和Hoechest33342染色进行细胞形态学分析，染色结果显示:在surfactin的作用下，HepG2细胞发生了胞质浓缩、核崩解等典型的凋亡形态学改变;利用流式细胞术检测发现，surfactin作用48小时，HepG2细胞凋亡率达到15.7±1.21％。Surfactin作用时间由0h延长至48h，G2/M期细胞的比例由11±2.1％增长至25.3±2.3％，即细胞发生了G2/M期阻断。这说明surfactin能诱导HepG2细胞凋亡，并发生G2/M期阻滞。 激光共聚焦实验表明:在surfactin的作用下，细胞中的ROS水平在0-4h内明显升高，并诱导胞浆内游离Ca2+浓度在0-9h明显升高;Ca2+水平提高依赖于IP3R及RyR孔道的开放;ROS及Ca2+能够作用于线粒体和内质网:诱导PT孔开放，导致膜电位消失，诱发内质网应激; 利用Westernblotting、RT-PCR等手段研究发现:在surfactin的作用下，ERK通路被阻断，并受到胞浆Ca2+的调控;阻断ERK通路能够上调Bax/Bcl-2二聚体的表达量，最终诱发细胞凋亡。
surfactin作用;肝癌细胞株;抗肿瘤作用;诱导凋亡
天津科技大学
硕士
营养与食品卫生学
曹小红
2012
中文
TS201.4;R730.5
59
2014-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）