阿特拉津免疫检测方法的研究
本论文对除草剂阿特拉津残留的直接竞争酶联免疫检测方法(ELISA)和胶体金免疫层析试纸条检测法进行了系统的研究。 成功制备了半抗原，采用活化酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)、卵清白蛋白（OVA）和辣根过氧化物酶（HRP）偶联制备免疫原、包被抗原和酶标抗原，免疫原免疫大耳白兔以后，成功获得了特异性抗阿特拉津的多克隆抗体。 建立了阿特拉津直接竞争ELISA方法，方法的半抑制浓度IC50为0.12ngmL-1，方法的最低检出限(LOD，以IC15计算)为0.01ngmL-1。11种结构类似的三嗪类除草剂中，抗体与扑灭津(96.53％)、扑草净(76.57％)和莠灭津(28.02％)的交叉反应较大，与其他除草剂的交叉反应率均小于20％。选择纯净水、自来水、井水、海河水、土壤和玉米作为样品进行了阿特拉津的添加回收实验，阿特拉津的回收率在76.5-108.1％之间，板内变异系数为3.2-8.2％，板间变异系数为5.2-9.6％，该检测结果与高效液相色谱分析法(HPLC)的检测结果有很好的相关性，两种方法检测结果的线性回归方程为y=1.004x-0.049，相关系数r2为0.991。以上结果表明本研究建立的ELISA方法具有很高的准确度和精确度，适用于快速检测水、土壤和玉米样品中阿特拉津的残留，并且可以实现大量样品的同时检测。 同时，以胶体金作为抗体标记物，建立了免疫层析试纸条快速检测方法，该方法的检出限定义为使试纸条检测线（T线）的条带颜色与质控线（C线）相比产生明显区别的阿特拉津的最小浓度，为2ngmL-1，检测时间为7-10min。选择纯净水、自来水、井水、海河水、土壤和玉米作为样品进行了加标检测，加标后的水样不需要任何处理直接用于试纸条检测，对水样的检出限为2ngmL-1;土壤和玉米样品经过简单的前处理后检测，对土壤和玉米样品的检出限为40μgkg-1，并且该方法的检测结果与ELISA方法的一致。该方法具有灵敏度高、检测快速、成本低等优点，适用于水、土壤和玉米样品中阿特拉津农药残留的现场快速筛选。
阿特拉津;免疫检测方法;胶体金;免疫层析试纸条
天津科技大学
硕士
营养与食品卫生学
王硕
2012
中文
TS207.53;Q503
62
2014-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）