Livin和Survivin在成釉细胞瘤中的表达和意义
目的： 成釉细胞瘤(ameloblastomas ABs)是发生于颌骨内的牙源性上皮来源的肿瘤，在国内其发生率约占牙源性肿瘤的60％。肿瘤内主要含成釉器样结构，但无釉质或其他牙体硬组织形成。大多数肿瘤发生于颌骨内，常导致颌骨的膨大和面部变形。虽属良性肿瘤，但其生长具有局部侵袭性，术后复发率较高，也有恶变甚至远处转移的报道。WHO2005年新分类将ABs分为4种临床病理行为不同的变异型，包括:实性/多囊型、骨外/外周型、促结缔组织增生型和单囊型。这些亚型在患者年龄、部位、影像学表现以及临床预后等方面均存在差异，以往对于其治疗多采用刮除术，由于其复发机率较大，所以目前多以扩大切除术为主，但仍有小部分患者有复发倾向。鉴于本病至今没有有效的治疗方法，因此研究其发病机制，寻找抑制肿瘤新的靶点，对预防和治疗本病有着较重要的意义。目前对ABs有较多的研究，对其分子生物学方面发病机制的探讨也不断有报道，由于其是与牙齿发育有关的肿瘤，以往研究发型凋亡抑制蛋白Livin和Survivin参与了牙齿发育的过程，因此推测凋亡抑制蛋白Livin和Survivin可能与ASs发生有一定相关性。Livin和Survivin是凋亡蛋白抑制因子IAP家族的重要成员，通过不同的途径抑制细胞凋亡。以往已证实了Livin和Survivin参与胚胎的发育和牙齿的发生，研究发现Livin和Survivin的异常诱导了肿瘤的发生，原因是Livin和Survivin诱导了细胞凋亡停止，而细胞增殖，因此产生了异常的新生物。但在成釉细胞瘤的患者中发生少之又少。因此本实验扩大样本量，检测Livin和Survivin在成釉细胞瘤中的表达，探讨成釉细胞瘤发生发展中细胞凋亡的作用及其与成釉细胞瘤临床生物学行为的关系。 方法： 实验标本来自2007年至2012年中国医科大学口腔医院外科和病理科，新鲜手术标本-86℃冻存。诊断标准依WHO2005分类标准。采取免疫组化SP法、Western-blot法和逆转录PCR(reverse transcription PCR)法分别检测ABs中Livin和Survivin蛋白的表达。 结果： 一、ABs中Livin免疫组化结果 Livin在ABs中大部分在胞浆表达，偶见胞核表达，以中度阳性强阳性为主，位于ABs的外周层及星网状层细胞浆中，胞浆阳性为88.7％(71/80)，正常口腔黏膜上皮细胞无表达，在口腔黏膜鳞状细胞癌(OSCC)呈阳性表达。 二、ABs中Livin蛋白表达结果 用Western-blot方法，以β-tublin做内参，检测了30例ABs中Livin表达情况。结果显示，Livin在ABs(0.87±0.23)中的表达明显高于正常黏膜(0.60±0.05)中的表达，具有统计学意义(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鳞状细胞癌(OSCC)(0.80±0.07)组织中的表达无明显差别(P＞0.05)。 三、ABs中Livin基因mRNA表达结果 用RT-PCR方法，以GAPDH做内参，检测了30例ABs中Livin的mRNA表达情况。结果显示30例ABs中有18例Livin mRNA表达（阳性率为60％），而10例口腔黏膜鳞状细胞癌OSCC中有5例Livin mRNA表达（阳性率为50％），10例正常黏膜中仅有2例Livin mRNA表达（阳性率为20％），Livin的表达高于正常黏膜，具有统计学意义(P＜0.05)。 四、ABs中Survivin免疫组化结果 Survivin在ABs中有胞浆的表达，并可见少量的细胞核表达，以中度阳性强阳性为主，位于ABs的外周层及星网状层细胞浆中，胞浆阳性为90.0％(72/80)，正常口腔黏膜上皮细胞无表达，在口腔黏膜鳞状细胞癌(OSCC)呈阳性表达。 五、ABs中Survivin蛋白表达结果 用Western-blot方法，以β-tublin做内参，检测了30例ABs中Survivin表达情况。结果显示，Survivin在ABs(0.78±0.12)中的表达明显高于正常黏膜(0.49±0.07)中的表达，具有统计学意义(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鳞状细胞癌(OSCC)(0.71±0.08)组织中的表达无明显差别(P＞0.05)。 六、ABs中Survivin基因mRNA表达结果 用RT-PCR方法，以GAPDH做内参，检测了30例ABs中Survivin的mRNA表达情况。结果显示30例ABs中有20例Survivin mRNA表达（阳性率为66.7％），而10例口腔黏膜鳞状细胞癌OSCC中有6例Survivin mRNA表达（阳性率为60％），10例正常黏膜中仅有2例Survivin mRNA表达（阳性率为20％）。Survivin的表达高于正常黏膜，具有统计学意义(P＜0.05)。 结论： ABs中Livin和Survivin在mRNA水平和蛋白质水平上表达都上调，并且Livin和Survivin均有胞浆及胞核的表达，提示Livin和Survivin在ABs的发生和发展中发挥重要的功能。
成釉细胞瘤;临床病理;Livin蛋白;Survivin蛋白;免疫组化
中国医科大学
硕士
口腔医学;口腔基础医学
钟鸣
2013
中文
R739.8;R730.2
51
2014-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）