实验室两种检测小儿巨细胞病毒方法的比较
前言： 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)感染在临床上较为普遍，胎儿以及幼龄儿童由于机体各器官发育不成熟，免疫抵抗能力相对较弱而较容易受到其入侵，其对患儿的肝脏、呼吸系统以及神经系统均存在不同程度的影响，这一方面不利于患儿的健康成长、甚至引发死亡，因此对于小儿巨细胞病毒感染必须给予高度的重视。对于巨细胞病毒感染的关键在于及时诊断和有效治疗，避免病情恶化而出现严重后果。临床上HCMV培养分离虽为感染确诊的金标准，但HCMV分离培养困难，费时耗力，影响及时治疗，故临床已应用较少。现在临床上一般采用ELISA法，胶体金法和PCR法检测特异性HCMV感染。但关于胶体金法和PCR法检测特异性HCMV感染的敏感性，准确度系统大样本比较，目前尚未见报道。本文采用辽宁地区分布的大样本，就胶体金法和PCR法对同一标本进行系统检测对比研究，为临床准确检测及诊断HCMV感染提供可靠依据。 方法： 1.收集临床上疑似HCMV感染的243例辽宁地区小儿的血液标本和其配对的尿液标本。 2.分别采用实时荧光定量PCR法和胶体金法检测这243例患儿外周血巨细胞病毒水平，得出各自方法的阳性率，进行统计学比较。 3.根据诊断标准，得出确诊患有HCMV感染性疾病的人数，换算出PCR法和胶体金法对检测HCMV的敏感度，进行统计学比较。 4.用实时荧光定量PCR法对其与血液配对的243例尿液标本进行检测，得出用PCR法检测尿液HCMV的阳性率，在与用PCR法检测血液HCMV的阳性率进行统计学比较。 结果： 1.243例血液标本进行荧光定量PCR法检测HCMV的阳性率11.93(29/243)％，243例血液标本进行胶体金法检测HCMV的阳性率为6.58(16/243)％。 2.在用胶体金法检测HCMV的16例阳性标本中，再用PCR法检测HCMV，阳性标本为16例。 3.在用PCR法检测HCMV的29例阳性标本中，再用胶体金法检测HCMV,阳性标本为16例。这16例阳性标本的HCMV DNA值在2.11×103～4.58×106拷贝/ml之间，平均3.43×105拷贝/ml。而胶体金法检测HCMV的13例阴性标本，HCMVDNA值在1.25×103～5.30×105拷贝/ml之间，平均2.32×104拷贝/ml。 4.两种检测方法阳性率比较，实时荧光定量PCR法检测HCMV阳性率高于胶体金法检测HCMV阳性率，差异有统计学意义(P＜0.01)。 5.两种检测方法敏感性比较，实时定量PCR法检测HCMV的敏感性72.5(29/40)％远大于胶体金法检测HCMV的敏感性40.0(16/40)％，差异有统计学意义(P＜0.01)。 6.用PCR法检测的尿液标本的阳性率为16.46(40/243)％，而用PCR法检测的血液标本的阳性率为11.93(29/243)％，血液和尿液标本HCMV的检出率比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论： 1.实时荧光定量PCR法在检测HCMV感染较胶体金法更准确。 2.实时荧光定量PCR法在检测HCMV感染较胶体金法更敏感。 3.实时荧光定量PCR法在检测HCMV感染时的标本选择上，应该优选尿液，其次是血液。
小儿巨细胞病毒;胶体金法;PCR法;临床诊断
中国医科大学
硕士
基础医学;免疫学
单风平
2013
中文
R725.6
33
2014-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）