钛板表面涂层MPC预防细菌生物膜形成的动物实验研究
目的：1.探讨动物体内钛板表面涂层2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(MPC)预防金黄色葡萄球菌生物膜形成的效果。2.验证通过化学接枝法制备的MPC涂层钛板在动物体内的稳定性。 方法：1.利用化学接枝法制备钛板表面MPC涂层，通过扫描电子显微镜观察其表面形态。2.将已消毒的MPC涂层钛板植入动物体内行稳定性试验，分别于植入前及植入后1、2、4及8W时应用能量色散X射线光谱仪(EDX)分析钛板表面MPC含量。3.建立实验动物模型:以金黄色葡萄球菌(ATCC25923)标准菌株作为实验用菌，将已消毒的MPC涂层钛板（实验组）及单纯钛板（对照组）在无菌条件下植入实验用SD大鼠背部肌肉层，同时在钛板局部注入0.2ml细菌浓度为1.5×107cfu/ml菌液建立局部感染模型。4.通过超声震荡-MTT活菌计数法检测动物模型建立后24、48h时细菌生物膜内活菌数量。5.于动物模型建立后24、48h时通过FITC标记的刀豆球蛋白A/碘化丙啶(FITC-ConA/PI)进行胞外多糖及细胞核双染色，激光共聚焦显微镜下观察钛板表面不同时间点BF形成及分布情况。6.应用扫描电子显微镜观察动物模型建立后24、48h时实验组及对照组钛板表面BF形态变化及体内物质粘附情况。 结果：1.钛板表面涂层MPC后，扫描电子显微镜观察见钛板表面形貌平整光滑，钛板原先的纹理消失。 2.稳定性实验结果显示在8W时间内通过化学接枝法制备的MPC涂层钛板在动物体内具有较好的稳定性。 3.体内放置24、48h时，实验组钛板表面活菌数量均显著少于对照组（P＜0.05）。 4.CLSM观察显示对照组钛板表面于24h时就已有大量细菌开始粘附，菌膜开始形成，而实验组钛板表面子24h时只有少量细菌粘附，无明显菌膜形成。48h时对照组钛板表面成熟稳定的菌膜已形成，而48h时实验组钛板表面仅有少量菌膜粘附。 5.SEM观察显示24、48h时，实验组钛板表面细菌及体内物质粘附量均明显少于对照组，且在实验组钛板表面菌膜形成量明显少于对照组。 结论：1.在动物体内MPC涂层可以有效抑制钛板表面细菌及体内物质粘附，预防钛板表面细菌生物膜的形成。 2.在8W时间内通过化学接枝法制备的MPC涂层钛板在动物体内具有较好的稳定性。
葡萄球菌;金黄色;2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱;钛板;生物膜;动物实验;化学接枝法
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
骨科学
王业华
2013
中文
R318.08
58
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）