Wnt/PCP信号通路在实验性大鼠结肠癌形成过程中作用的初步研究
目的:通过MNU灌肠法建立SD大鼠结肠肿瘤模型,用免疫组化法及RT-PCR检测Wnt/PCP信号通路中重要因子在结肠癌组织、结肠非典型增生组织和正常结肠组织中表达情况,确定Wnt/PCP信号通路在大鼠结肠癌形成过程中的作用,为结肠癌的靶向治疗寻找新的靶点提供一定的实验基础。 方法:健康4~6周龄雄性SD大鼠60只,体重150~180g,用MNU灌肠法诱导大鼠形成结肠肿瘤模型。将MNU用二甲基亚砜配成4mg/ml的溶液,每次灌注剂量为2mg/100g;灌肠频率,开始时以3次/周灌肠4周,之后持续以1次/周灌注,灌肠深度约为6~8cm。于12周和16周分批处死大鼠,术前禁食12小时,予4%水合氯醛1ml/100g腹腔麻醉,开腹后仔细解剖肠道及周围淋巴结,观察肝脏、膀胱等组织是否伴有转移,切除全部结肠,寻找肿瘤组织,对于疑似结肠肿瘤分为两部分,取一部分组织以10%中性福尔马林固定备病理及免疫组化分析用,另一部分放置在-80℃冰箱中保存,以备RT-PCR分析用。取距肿瘤5cm外的正常结肠组织作为对照组。用免疫组化法和RT-PCR法检测Wnt/PCP信号通路中重要因子Wnt7a、JNK、RhoA在大鼠结肠癌组织、结肠非典型增生组织和正常结肠组织中的表达情况。 结果:通过MNU灌肠诱导,60只SD大鼠取标本后经病理证实,有28只大鼠形成结肠非典型增生,23只形成结肠癌。经RT-PCR检测后统计发现Wnt7a、JNK和RhoA mRNA在结肠非典型增生组织及结肠癌组织中的表达高于正常结肠组织;进一步通过免疫组化技术检测发现Wnt7a、JNK和RhoA蛋白在结肠非典型增生组织和结肠癌组织中的表达同样高于正常结肠组织,差异有统计学意义;而Wnt7a、JNK和RhoA蛋白和mRNA在结肠癌和结肠非典型增生组织中表达却无明显差异。 结论:1.通过MNU灌肠可以成功诱导大鼠形成结肠肿瘤模型。2.Wnt7a、JNK和RhoA在大鼠结肠非典型增生组织和结肠癌组织中表达均高于正常结肠组织,即Wnt/PCP信号通路在结肠非典型增生和结肠癌组织中高表达,Wnt/PCP信号通路在大鼠结肠癌发生发展过程中可能起重要作用。
结肠癌;信号通路;免疫组化法;靶向治疗;动物模型
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
外科学(普外科)
王建
2013
中文
R735.35
53
2014-02-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)