L-精氨酸联合氨基胍应用对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响
目的：通过联合应用一氧化氮供体L-精氨酸(L-Arginine，L-Arg)和选择性iNOS抑制剂氨基胍(Amino guanidine，AG)，观察对脑缺血再灌注后神经元损伤的影响，为治疗脑缺血再灌注损伤提供新的方法。 方法：实验用SD雄性大鼠，采取大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusionand，MCAO)，缺血时间为2h，再灌注70h。实验分为4部分进行: 1.再灌注后不同时间给予L-Arg的作用:实验分为4组(n=6-9):vehicle组、早期给药组、晚期给药组和全程给药组。全程给药的时间点是脑缺血发生后2h，12h，24h，36h，48h，60h;早期给药的时间点仅为脑缺血发生后2h;晚期给药的时间点是缺血发生后2h以后的其它所有时间点。每个时间点注射L-Arg300mg/kg一次。 2.全程应用L-Arg联合晚期应用AG的治疗作用:实验分为5组(n=9):vehicle组、AG50mg/kg组、AG100mg/kg组、AG200mg/kg组和AG300mg/kg组。全程应用L-Arg的时间点为全程给药时间点，剂量是300mg/kg;晚期联合AG给药的时间点为晚期给药时间点。 3.同时联合L-Arg和AG的治疗作用:实验分为5组(n=9):vehicle组、差时给药组、2h同时给药组、12h同时给药组、和24h同时给药组。其中差时给药组的给药方法同第二部分中AG200mg/kg组，其余3个用药组分别在2h，12h，24h这3个时间点开始联合用药，L-Arg的剂量是300mg/kg，AG的剂量是200mg/kg。 4.L-Arg和AG联合应用与单独应用L-Arg或AG治疗作用的比较。实验分为4组（n=6-9）:vehicle组、L-Arg联合AG组、L-Arg组和AG组。L-Arg联合AG组全程时间点给予L-Arg和AG; L-Arg组仅在早期给药时间点给予L-Arg一次;AG组给药时间为晚期给药时间点;L-Arg剂量为300mg/kg，AG剂量为200mg/kg。 以上各部分的vehicle组均在全程给药时间点注射生理盐水，各组大鼠给药方式均为腹腔注射。每组大鼠均在全程给药时间点后0.5h测量平均动脉压和体温，并于再灌注后70小时处死取材，采用氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Triphenyltetrazoliumchloride，TTC)染色法分别测定患侧脑皮质和纹状体梗死体积百分比。 结果：各部分实验结果如下: 1.与vehicle组比较，早期给药组大鼠大脑皮质梗死体积明显减少(P＜0.05），而晚期给药组和全程给药组大鼠大脑皮质梗死体积则有明显增加(P＜0.05）。 2.与vehicle组比较，AG100mg/kg组、AG200mg/kg组、AG300mg/kg组大鼠大脑皮质梗死体积均明显减少(P＜0.05)，与AG100mg/kg组比较，AG200mg/kg组、AG300mg/kg组大鼠大脑皮质梗死体积明显减少(P＜0.05)，而与200mg/kg组比较，300mg/kg组大鼠大脑皮质梗死体积变化无统计学意义。 3.与vehicle组比较，其余四组大鼠大脑皮质梗死体积均有明显减少(P＜0.05)，而与差时给药组比较，2h同时给药组大鼠大脑皮质梗死体积变化无统计学意义。 4.与vehicle组比较，其余三组大鼠大脑皮质梗死体积均明显减少(P＜0.05），而与L-Arg联合AG组比较，L-Arg组与AG组的大脑皮质梗死体积均明显增加(P＜0.05)。 各组大鼠的平均动脉压、体温以及纹状体的梗死体积均无统计学差异。 结论：联合应用L-Arg和AG治疗脑缺血再灌注损伤，比单独应用L-Arg或者AG具有更加明显的效果，且不必考虑缺血发生的准确时间，并具有较长的治疗时间窗，为治疗脑缺血再灌注损伤提供了新的方法。
再灌注损伤;内皮型一氧化氮合酶;诱导型一氧化氮合酶;L-精氨酸;氨基胍;局灶性脑缺血;动物模型
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
麻醉学
王志萍
2013
中文
R743.31;R651.12
68
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）