浅低温对大鼠全脑缺血再灌注酸敏感离子通道1a和2a的影响
目的：观察浅低温对大鼠全脑缺血再灌注后酸敏感离子通道1a(Acid-SensingIon Channel1a, ASIC1a)和2a(Acid-Sensing Ion Channel2a，ASIC2a)的影响，旨在探讨浅低温复苏神经元的潜在机制。 方法：95只雄性SD大鼠按随机数字表均分为以下五组(n=19):假手术组(Ⅰ)、模型组(Ⅱ)、浅低温组(Ⅲ)、PcTX1组(Ⅳ)、浅低温+PcTX1组(Ⅴ)。采用Pulsinelli四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型，缺血15min，再灌注即刻Ⅳ组和Ⅴ组侧脑室注射PcTX16μl(500 ng/ml)，其余各组侧脑室注射等容量生理盐水。同时Ⅲ组和Ⅴ组于再灌注15min内将直肠温度降至32～33℃，并维持6h，其余组采用白炽灯维持直肠温度36～37℃。再灌注6h及24h后断头取海马，采用westernblot法测定ASIC1a和ASIC2a蛋白水平;再灌注24 h后断头取海马，采用qRT-PCR法测定ASIC1a和ASIC2a mRNA表达水平，HE染色观察海马CA1区形态学改变;再灌注72 h心脏灌注后断头取大鼠脑组织测定脑含水量。 结果：①与Ⅰ组相比，其余四组ASIC1amRNA表达和ASIC1a蛋白水平差异无统计学意义(P＞0.05);②与Ⅰ组相比，其余四组ASIC2a mRNA表达和ASIC2a蛋白水平均增高（P＜0.05），与Ⅰ组比，Ⅲ组和Ⅴ组ASIC2a mRNA表达和ASIC2a蛋白水平增高(P＜0.05);与Ⅳ组比，Ⅲ组和Ⅴ组ASIC2amRNA表达和ASIC2a蛋白水平增高(P＜0.05);且与再灌注6h相比，再灌注24 hⅡ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组ASIC2a蛋白水平均增高(P＜0.05);③与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组CA1区锥体细胞数均减少(P＜0.01);与Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组CA1区锥体细胞数均增加(P＜0.01)，尤以Ⅴ组增加最多(P＜0.01);④与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组脑含水量均增加(P＜0.01);与Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组脑含水量均降低(P＜0.01)，Ⅴ组降低最多(P＜0.01)。 结论：浅低温减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤可能与ASIC2a mRNA表达和ASIC2a蛋白水平上调有关，且浅低温联合PcTX1对缺血神经元复苏具有协同作用。
酸敏感离子通道;脑缺血;再灌注损伤;浅低温;动物模型
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
麻醉学
段满林
2013
中文
R743.31
58
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）