中脑VTA-NAc多巴胺奖赏环路介导imipramine镇痛效应及其机制研究
目的：抗抑郁药在治疗慢性疼痛中备受青睐，临床及基础研究都证实其具有明显的镇痛效果。但是抗抑郁药是如何发挥镇痛效应，其机制至今不是很明确。本实验组研究发现，中脑VTA-NAc多巴胺奖赏环路及该环路中的BDNF参与慢性神经病理性疼痛的形成过程。本实验主要探讨中脑VTA-NAc多巴胺奖赏环路是否参与了imipramine镇痛效应及其可能的机制。 方法：1.观察慢性注射imipramine的镇痛作用及其对VTA-NAc环路兴奋性的影响:于CCI术后3天开始腹腔慢性注射imipramine(30mg/kg)，给药后1，3，7，14天等各个时间点测量小鼠热缩足潜伏期;依据行为学选择适当的时间点取材，用免疫组化及Western blot方法分别检测VTA、NAc区c-Fos和BDNF的表达。 2观察兴奋VTA-NA环路后对imipramine的镇痛作用的影响及该环路中c-Fos蛋白及BDNF表达变化:CCI小鼠经腹腔慢性注射imipramine14天后，于CCI对侧VTA注射小剂量的bacolfen或morphine，检测给药后各时间点0.5h，1h，2h，4h，8h的疼痛行为学变化;依据行为学取材分析c-Fos及BDNF的表达变化。 3.证实VTA-NAc多巴胺奖赏环路的BDNF是否介导了imipramine的镇痛效应:CCI小鼠经腹腔慢性注射imipramine14天后，于CCI对侧NAc注射小剂量的外源性BDNF，观察给药后慢性imipramine处理的CCI小鼠1h,2h，4h疼痛行为学变化。 结果： CCI疼痛小鼠经腹腔慢性注射imipramine显著地抑制了CCI诱发的热痛觉过敏行为。给药后第14天取材，免疫组化分析显示VTA及NAc区CCI诱发的c-Fos表达显著减少。在CCI对侧的VTA注射小剂量的baclofen(5nM/0.15 ul)和小剂量的morphine（50 nM/0.15 ul），显著地翻转了丙咪嗪的镇痛效应;免疫组化检测结果也显示，VTA及NAc的c-Fos蛋白表达增加。Western blot分析发现，CCI疼痛小鼠VTA-NAc环路的BDNF也被imipramine慢性用药所抑制;VTA注射小剂量的baclofen或小剂量的morphme后，则翻转了imipramine对BDNF的下调;在VTA多巴胺神经元投射区NAc注射小剂量的外源性BDNF（5ng/0.2 ul），逆转了imipramine的镇痛作用。 结论：中脑VTA-NAc多巴胺奖赏环路通过调控BDNF的表达参与了imipramine的镇痛效应。
神经病理性疼痛;多巴胺神经元;镇痛效应;抗抑郁药;动物模型
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
麻醉学
曹君利
2013
中文
R441.1
58
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）