miR-130a靶向调节PTEN基因影响人乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性
目的：探讨miR-130a对PTEN基因表达的调控，以及它们与乳腺癌MCF-7细胞株阿霉素耐药的关系。 方法：利用miRNA芯片结合RT-qPCR的方法检测并验证miR-130a在人乳腺癌亲代敏感细胞(MCF-7/S)、同系阿霉素耐药细胞(MCF-7/Adr)和多西紫杉醇耐药细胞(MCF-7/Doc)中的表达差异;通过靶基因预测软件预测PTEN可能为miR-130a的特异性靶基因;通过miR-130a模拟物(mimics)和抑制物(inhibitors)转染实验结合MTT法、RT-qPCR和免疫印迹法，观察miR-130a的表达变化对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的影响及其与PTEN基因表达间的关系。 结果：与MCF-7/S相比，miR-130a在MCF-7/Adr中的表达水平明显增高（116834.70±4728.32倍;t=19.035，P=0.000），但在多西紫杉醇耐药株MCF-7/Doc中的表达无统计学差异(t=0.703，P=0.521)。MCF-7/S细胞转染miR-130amimics后，与阴性对照组相比，其miR-130a表达水平明显增高（17.686±1.057倍;t=8.360，P=0.001），对Adr的耐药性增强[IC50:(0.606±0.164)mg/L vs(0.181±0.060)mg/L; t=5.200，P=0.007]，同时PTEN mRNA和蛋白表达水平明显下调，分别为阴性对照组的0.362±0.076倍（t=2.927，P=0.043）和0.386±0.020倍(t=20.713，P=0.0003);而MCF-7/Adr转染miR-130a inhibitors后，其miR-130a表达水平是阴性对照组的0.169±0.035倍（t=12.036，P=0.0002），对Adr的耐药性明显减弱[IC50:(23.366±1.304)mg/L vs(46.206±1.963)mg/L; t=16.784，P=0.007]，同时PTEN mRNA和蛋白表达水平均明显上调，分别是阴性对照组的3.564±0.336倍（t=4.122,P=0.015）和2.019±0.268倍（t=8.999,P=0.0008）。 结论： miR130a可能通过靶定PTEN基因来增强乳腺癌细胞对阿霉素的耐药性。
乳腺癌;阿霉素;敏感性;基因表达;耐药性
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
外科学
唐金海
2013
中文
R737.9
52
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）