接枝MPC钛板联合外周使用青霉素对菌膜形成的动物实验研究
目的：通过动物实验来验证在体内环境中接枝MPC的钛板联合外周使用青霉素是否具有进一步增强MPC对细菌生物膜形成的抑制作用及MPC抗细菌黏附的程度。 方法：取直径为1cm厚度为0.8mm的圆形医用钛板86枚随机分成两组，每组43枚，其中一组经一系列化学接枝方法将MPC接枝到医用钛板表面，另外一组43枚钛板不接枝，将这86枚医用钛板分别置入随机分配好的四组每组7只的健康成年SD级大鼠（雌雄不限）的背部肌肉组织中，A组接枝MPC的钛板联合使用青霉素、B组接枝MPC的钛板未使用青霉素、C组未接枝MPC的钛板使用青霉素、D组未接枝MPC的钛板未使用青霉素组四个组，每只大鼠体内放置相应的3枚钛板;同时将事先培养好的标准金黄色葡萄球菌配成107 CFU/ml数量级悬浊液在手术过程中分别注入医用钛板周围软组织中，使其塑造一个局部感染模型，按时注射青霉素或生理盐水，由于生物膜形成时间为1～2天，手术后24小时在每组中随机处死一只大鼠取出医用钛板一枚用扫描电子显微镜(SEM)观察细菌粘附数量及生物膜形态，一枚用通过刀豆球蛋白A/碘化丙啶(FITC-ConA/PI)进行胞外多糖及细胞核双染色激光共聚焦显微镜(CLSM)观察生物膜形态;48小时后将剩余的大鼠全部处死，取出的每只大鼠体内的3枚钛板1枚用CLSM观察生物膜生长情况;1枚用SEM观察生物膜形态，1枚超声洗涤浮游菌，培养24小时后测其活菌数量行统计学分析。 结果： 1、在SEM下接枝MPC后的钛板表面较未接枝者更光滑、平坦;在相同的时间段相同的高倍视野下细菌粘附数量变化为A组＜B组≈C组＜D组;在动物体内培养48小时后在高倍镜下D组呈现明显的菌膜生成，细菌粘附量较多;B、C组有少量菌膜生成细菌的粘附量也相应的减少;A组只有微量细菌粘附，未见明显的生物膜形成。 2、在相同时间段用CLSM观察发现D组出现细菌、菌膜的数量最多，铺满整个视野，A组最少视野内呈零星散在分布，B、C组均稍多。 3、各组钛板经超声洗脱生物膜内活菌体外培养24小时后活菌数量A组＜B组≈C组＜D组，除B、C组间无统计学意义(p＞0.05)，其余各组间均有统计学意义(p＜0.05)。 结论：接枝MPC的钛板可明显减少或延缓金黄色葡萄球菌的黏附及细菌生物膜的形成;外周使用青霉素能减轻或延缓细菌生物膜的形成;接枝MPC钛板联合外周应用青霉素对生物膜的抑制程度更佳。
金黄色葡萄球菌;2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱;生物膜;青霉素;动物实验;医用钛板
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
骨科学
王业华
2013
中文
R318.17;R-332
63
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）