E3泛素连接酶CHIP对脑胶质瘤细胞生物学行为影响的研究
目的：探讨CHIP（carboxy terminus of Hsc70 interacting protein，Hsc70羧基端相互作用蛋白）对脑胶质瘤细胞U87和U251生物学行为的影响。 方法： Western blot实验观察CHIP siRNA、CHIP过表达质粒能否干涉脑胶质瘤细胞中CHIP蛋白的表达;CCK-8细胞增殖实验检测CHIP基因干涉后对U87和U251两种脑胶质瘤细胞增殖的影响;流式细胞仪检测两种脑胶质瘤细胞周期及凋亡的变化;Transwell细胞迁移实验观察CHIP基因干涉后对U87和U251两种脑胶质瘤细胞迁移能力的影响;Transwell细胞侵袭实验观察CHIP基因干涉后对两种脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响。 结果： CHIP siRNA、CHIP过表达质粒能够干涉U87和U251两种脑胶质瘤细胞中CHIP蛋白的表达(P＜0.001);CHIP siRNA干涉后两种脑胶质瘤细胞的增殖速度明显增快，而过表达CHIP后两种脑胶质瘤细胞的增殖速度明显减慢，72、96 h干涉最明显(P＜0.001);与对照组相比CHIP siRNA干涉后两种脑胶质瘤细胞G0/G1期细胞所占比例减少，S期、G2/M期细胞所占比例增加;而过表达CHIP后两种脑胶质瘤细胞G0/G1期细胞所占比例增加，S期、G2/M期细胞所占比例减少;CHIP siRNA干涉后与对照组相比脑胶质瘤细胞U251凋亡细胞数减少(P＜0.001)，对脑胶质瘤细胞U87凋亡的影响与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);而过表达CHIP后与对照组相比脑胶质瘤细胞U251凋亡细胞数增加(P＜0.001)，对脑胶质瘤细胞U87凋亡的影响与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);CHIP siRNA干涉后U87和U251两种脑胶质瘤细胞的迁移侵袭能力与对照组相比分别增加了9％(P＜0.05)、27％(P＜0.01)和18％、36％(P＜0.01);过表达CHIP后U87和U251两种脑胶质瘤细胞的迁移侵袭能力与对照组相比分别降低了45％(P＜0.001)、37％(P＜0.01)和27％、38％(P＜0.01)。 结论：1.CHIP siRNA能够促进U87和U251两种脑胶质瘤细胞G0/G1期进展，从而促进两种脑胶质瘤细胞的增殖;CHIP siRNA能够抑制脑胶质瘤细胞U251的凋亡;并且能够促进两种脑胶质瘤细胞的迁移、侵袭;2.过表达CHIP能够阻碍U87和U251两种脑胶质瘤细胞G0/G1期进展，从而抑制两种脑胶质瘤细胞的增殖;过表达CHIP能够促进脑胶质瘤细胞U251的凋亡;并且能够抑制两种脑胶质瘤细胞的迁移、侵袭;3.CHIP作为抑癌因子对脑胶质瘤细胞的恶性生物学行为有明显抑制作用;4.CHIP将为脑胶质瘤的治疗提供新的可能的治疗靶点。
E3泛素连接酶;脑胶质瘤;生物学行为;细胞周期;侵袭能力
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
神经外科
范月超
2013
中文
R739.41
64
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）