BDNF-ERK1/2-CREB信号通路在alarin抗小鼠慢性抑郁模型中的作用
目的：研究新的生物活性肽alarin对慢性不可预知温和刺激(UCMS)小鼠的抗抑郁样作用，并初步探讨该作用与BDNF-ERK1/2-CREB信号通路的关系。 方法：6周龄雄性昆明小鼠(18±2g)40只，采用UCMS模型，刺激共进行7周。随机分为四组:①正常对照组（Control）②UCMS模型组(Model)③alarin低剂量组（Ala L0.5nmol）④alarin高剂量组(Ala H1nmol)。应激前测量基础糖水消耗率，应激开始后每周上午进行体重测量，应激7周后各组小鼠侧脑室给予相应的药物，给药体积3μl，每天一次，给药两天，第一天给药后进行糖水偏好实验，第二天给药45min后进行旷场实验和强迫游泳实验。 行为学实验结束后，处死小鼠，分别取每只小鼠的皮层、海马、嗅球和下丘脑这四个不同的脑区，保存于-80℃冰箱备用。采用RT-PCR的方法检测小鼠各脑区BDNF和CREB的mRNA表达;采用Western-blot方法检测小鼠各脑区中p-ERK1/2的蛋白表达。 结果： 1.UCMS对小鼠体重的影响 小鼠在应激前的平均体重为(18.5±1.7)g，应激5周后，正常对照组小鼠的平均体重为(26.4±4.2)g，而模型组小鼠的平均体重为(22.2±2.2)g，两组小鼠的体重差异具有统计学意义（P＜0.05）;应激7周后，正常对照组小鼠的平均体重为(27.6±4.3)g，而模型组小鼠的平均体重为(22.2±2.8)g，两组间的体重差异更为明显（P＜0.01）。 2.Alarin对UCMS小鼠行为学的影响 (1)小鼠糖水偏好实验小鼠在应激前的平均糖水消耗率为74.12±12.21％;应激7周后，正常对照组小鼠的平均糖水消耗率为74.32±11.89％，而模型组小鼠的平均糖水消耗率降低为57.48±15.41％（P＜0.05）;而alarin低剂量组(0.5nmol)和alarin高剂量（1nmol）的糖水消耗率分别是65.52±10.38％、66.10±11.48％，与模型组相比，糖水消耗率有所增加，但不具有统计学意义。 (2)小鼠旷场实验UCMS7周后，在旷场实验中，模型组小鼠的垂直运动得分(14.4±6.6)、水平运动得分(14.7±5.9)和清洁动作次数(2.4±1.8)较正常对照组的垂直运动得分(37.3±13.8)、水平运动得分(47.4±19.8)和清洁动作次数(7.9±3.3)均明显减少（P＜0.01）;而alarin低剂量组(0.5nmol)小鼠的垂直运动得分(18.1±6.1)、水平运动得分(21.7±6.7)、清洁动作次数(3.8±1.9)和alarin高剂量组(1nmol)小鼠的垂直运动得分(25.0±7.6)、水平运动得分(29.0±8.9)、清洁动作次数(5.1±3.6)，与模型组相比，这三个指标均有所增加，其中alarin高剂量组作用比较明显(P＜0.05)。 (3)小鼠强迫游泳实验UCMS7周后，正常对照组小鼠的强迫游泳不动时间为(49.9±15.2)s，而模型组小鼠强迫游泳的不动时间为(168.4±26.6)s，两组间差异明显（P＜0.01）;而alarin低剂量组（0.5nmol）和alarin高剂量组（1nmol）小鼠的不动时间分别是(101.8±22.5)s、(80.7±19.9)s，与模型组相比，强迫游泳的不动时间均明显缩短（P＜0.01）。 3.Alarin对UCMS小鼠脑中BDNF和CREB mRNA表达的影响 RT-PCR结果显示:①与正常对照组相比，模型组小鼠的皮层和海马中BDNFmRNA的表达降低（P＜0.01），而在嗅球和下丘脑中BDNF mRNA的表达稍有降低，但差异不具统计学意义。alarin低剂量组（0.5nmol）和alarin高剂量组(1nmol)中小鼠皮层和海马BDNF mRNA的表达与模型组比较增加（P＜0.05）。②与正常对照组相比，模型组小鼠的皮层、海马、嗅球和下丘脑中CREB mRNA的表达降低(P＜0.01)，而alarin低剂量组(0.5nmol)和alarin高剂量组（1nmol）中小鼠皮层、嗅球和下丘脑CREB mRNA的表达均增加（P＜0.05）。 4.Alarin对UCMS小鼠脑中p-ERK1/2蛋白表达的影响 Western-blot结果显示:与正常对照组相比，模型组小鼠的皮层、海马和嗅球中的p-ERK1/2的表达降低(P＜0.01)，下丘脑中p-ERK1/2的表达无变化;而alarin低剂量组(0.5nmol)和alarin高剂量组(1nmol)中小鼠皮层、海马和嗅球中的p-ERK1/2的表达均增加(P＜0.05)。 结论： 1.Alarin缩短UCMS小鼠强迫游泳的不动时间;增加其旷场实验中的垂直运动和水平运动得分及清洁动作次数，说明其具有对抗小鼠抑郁样的作用; 2.Alarin的抗抑郁作用可能与其上调小鼠皮层和海马组织中的BDNF、ERK1/2和CREB，嗅球组织中的ERK1/2和下丘脑组织中的CREB的表达有关。
抑郁症;脑源性神经营养因子;细胞外信号调节蛋白激酶;元件结合蛋白;动物模型
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
药理学
谷淑玲
2013
中文
R749.41
58
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）