荷包牡丹碱对人胃癌SGC-7901细胞生长的作用及机制研究
目的：探讨荷包牡丹碱对人胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用及其可能的机制，为胃癌的药物治疗提供一定的体外实验研究的依据。 方法：将人胃癌SGC-7901细胞常规培养于含10％胎牛血清、青霉素-链霉素溶液(100X)、pH为7.2-7.3的RPMI1640培养液中，在37C、5％CO2及饱和湿度培养箱中培养24h、48h、72h。实验分阴性对照组、溶剂DMSO组及荷包牡丹碱(25μmol/l、50μmol/l、100μmol/l、200μmol/l)作用组。分别采用:1）四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞体外增殖情况;2）Hoechest33258染色观察细胞凋亡形态学变化;3）流式细胞术检测细胞凋亡率;4）Westernblot法检测Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。 结果：1).SGC7901细胞与不同浓度的荷包牡丹碱培养后，细胞生长受到不同程度的抑制，并随时间的延长抑制率逐渐升高，24h、48h、72h各时间段，荷包牡丹碱各浓度组与阴性对照组相比，差别均有统计学意义(P＜0.05)。而阴性对照组与溶剂组相较，差别无统计学意义(P＞0.05)。2).药物作用72h后，行Hoechest33258染色可见阴性对照组及DMSO组细胞的细胞核呈卵圆形，染色均匀，药物荷包牡丹碱组可见部分细胞核荧光增强，胞核缩小呈浓缩现象，细胞核的染色质高度凝聚、荧光显著增强，并有部分细胞核边缘化，甚至裂解为碎块，产生凋亡小体。3）.流式细胞术分析显示:作用72h后，药物荷包牡丹碱200μmol/l组与阴性对照组及DMSO组相较，差别均有统计学意义(P＜0.05)，而阴性对照组与DMSO组相较，差别无统计学意义(P＞0.05).4).Western blot法检测显示:与阴性对照组相比，药物作用后Bcl-2表达降低，Bax、 Caspase-3表达升高，Bcl-2/Bax比例减小。 结论：1.荷包牡丹碱在体外对胃癌细胞的增殖与生长具有抑制作用。 2.荷包牡丹碱可促进胃癌细胞的凋亡。 3.荷包牡丹碱诱导凋亡的作用可能与协同促进Bax、Caspase-3的高表达及Bcl-2的低表达有关。
胃癌;荷包牡丹碱;细胞凋亡;疗效评价
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
内科学(消化病学)
陈剑群
2013
中文
R273;R735.2;R285
48
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）