三氧化二砷对人肾母细胞瘤细胞的抗肿瘤作用及对BcL-2 Caspase3表达的影响
目的:观察三氧化二砷(As2O3)对体外人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1细胞株增殖和凋亡的影响,探讨凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase3的变化及其在凋亡过程中的作用机制。 方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度As2O3作用于人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞,实验分为A、B、C、D和E5组,其细胞培养液中三氧化二砷的药物终浓度分别为0,1.25,2.5,5,10μmol/1,培养24h后收集细胞。通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度As2O3对SK-NEP-1细胞的增殖抑制率;应用Annexin-V和PI双染细胞流式法检测细胞凋亡率;ELISA法检测SK-NEP-1细胞Bcl-2蛋白的表达;Caspase3试剂盒检测细胞Caspase3活性变化情况。 结果:1.MTT检测显示各实验组可明显抑制SK-NEP-1细胞增殖,其增殖抑制率较对照组明显增加(P<0.05),随着As2O3浓度增加,其增殖抑制率逐渐升高.2.流式细胞仪检测各实验组细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.05),细胞凋亡率与As2O3呈浓度依赖性。3.ELISA结果显示实验组Bcl-2蛋白表达较对照组明显减少(P<0.05)。4.As2O3作用SK-NEP-1细胞后Caspase3活性表达上调。以上检测各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论:三氧化二砷能明显抑制SK-NEP-1细胞的增殖,并进一步诱导其凋亡;可以下调SK-NEP-1细胞中Bcl-2蛋白表达,并激活Caspase3活性。
肾母细胞瘤;三氧化二砷;细胞凋亡;蛋白表达
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
儿科学
薛天阳
2013
中文
R737.11;R730.21
39
2014-02-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)