呼吸道合胞病毒感染对哮喘小鼠中转录因子T-bet、GATA-3表达的影响及其与IFN-γ、IL-4相关性分析
目的: 研究RSV感染哮喘小鼠后小鼠肺组织中T-bet、GATA-3的表达变化及细胞因子IFN-γ及IL-4在外周血中的水平,并分析其相关性。 方法: 健康雌性Balb/c小鼠40只,按随机数字表法分为正常组、呼吸道合胞病毒(RSV)组、哮喘组、双重干预组,每组10只。通过卵白蛋白致敏及雾化激发建立哮喘模型,通过鼻腔滴入的方式感染RSV。各组小鼠于最后一次激发后24 h,处死动物进行各项检测:取小鼠肺组织苏木精-伊红(HE)染色观察病理改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量方法检测肺组织RSV、T-bet、GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清中IFN-γ、IL-4的含量变化。 结果: 1.肺组织病理染色显示。 正常组无明显炎症细胞浸润,细支气管管壁完整,肺泡间隔细;RSV组肺泡间隔充血,水肿,增厚,断裂,炎性细胞浸润较明显;哮喘组细支气管粘膜增厚,大量炎性细胞浸润,管腔狭窄,肺泡上皮破坏;双重干预组在气管周围大量淋巴细胞浸润形成,肺泡间隔增厚,炎性浸润较前3组明显增多。 2.肺组织RSV mRNA鉴定结果显示。 正常组和哮喘组未检测到RSV mRNA表达,而RSV组及双重干预组中RSVmRNA表达明显,证明感染成功。 3.肺组织中T-bet及GATA-3 mRNA表达及与血清中IFN-γ、IL-4相关性分析。 哮喘组、RSV组和双重组T-bet表达较正常组明显降低,其中双重组比前两组表达亦明显降低,与IFN-γ变化呈正相关;而GATA-3在哮喘组、RSV组和双重组表达较正常组明显增高,而其中双重组比前两组表达显著增高,且与IL-4表达量成正相关。 结论: 1.RSV感染哮喘小鼠可以导致T-bet低表达和GATA-3高表达,改变程度较单纯RSV感染组和哮喘组小鼠更明显,提示二者在RSV加重哮喘机制方面起到一定作用。 2.T-bet和GATA-3与IFN-γ、IL-4的相关性,提示T-bet/GATA-3也可以作为哮喘的一项评价指标。
哮喘;呼吸道合胞病毒;中转录因子;基因表达;相关性分析
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
儿科学
武怡
2013
中文
R562.250.2
44
2014-02-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)