Rho/Rock信号通路在异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌重塑中的作用
目的：研究Rho/Rock信号转导通路在异丙肾上腺素(Isoproterenol ISO)诱导的大鼠心肌重塑中的作用及其机制。 方法：1、将30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成3组:空白对照组（空白组）、ISO模型组（模型组）、法舒地尔(Fas)组，每组10只。模型组、Fas组皮下多点注射ISO(5mg.kg-1.d-1×10d)建立大鼠心肌纤维化模型，给药结束后Fas组给予法舒地尔(5mg.kg-1.d-1)分两次腹腔注射6周，模型组及对照组给予等量生理盐水腹腔注射，共6周。 2、6周后，用10％水合氯醛麻醉后将大鼠处死，用电子天平准确称量大鼠体重（BW)、心脏重量(HW)，计算各组心脏重量指数(HW/BW，即HWI);取左室心肌组织进行苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin，HE)染色、MASSON染色，观察心肌细胞直径(MD)及胶原纤维容积分数(CVF)的变化;免疫组织化学方法(Immunohistochemistry，IHC)检测心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平，计算平均光密度(Integral optical density, IOD);酶联免疫吸附法(Enzyme-LinkedImmunosorbent Assays，ELISA)检测血清脑钠肽(BNP)浓度;反转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)检测心肌组织中RhoA、RockmRNA的表达。 结果：1、大鼠一般情况:空白对照组:一般状况良好，毛色有光泽，双目灵活有神，行动敏捷，对周围变化反应灵敏，摄食及饮水量可;模型组:大鼠后期毛色逐渐失去光泽，精神萎靡，行动迟缓，喜蜷缩，摄食、饮水量减少;药物干预Fas组一般状况较模型组有明显改善。试验期间，模型组大鼠死亡2只。其余组后未见大鼠死亡。 2、心脏重量指数(HWI)的测定:与空白组比较，模型组HWI(3.68±0.089 vs3.12±0.078)明显增高(P＜0.01）;与模型组比较，Fas组HWI(3.50±0.118)显著降低（均P＜0.01)。 3、病理学检测:HE染色显示:空白组大鼠心肌结构清晰，形态未见明显异常。模型组大鼠心肌纤维排列紊乱，心肌细胞明显肿大、排列紊乱，细胞核明显增大变圆，肌丝纹理增粗;Fas组大鼠心肌病理学改变有明显改善;与空白组比较，模型组MD(17.95±1.155 vs14.99±1.837)和CVF(5.67±0.414 vs3.59±0.631)显著升高（均为P＜0.01）;与模型组比较，Fas组MD(16.50±1.119)和CVF(4.15±0.707)降低（分别为P＜0.05、P＜0.01）。 4、血清学指标BNP检测:与空白组比较，模型组BNP(181.54±42.636 vs63.44±29.971)明显升高(P＜0.01）;与模型组比较，Fas组(83.95±26.931)明显降低(为P＜0.01)。 5、免疫组织化学染色方法观察TGF-β1蛋白表达:与空白组比较，模型组TGF-β1蛋白(IOD为29.27±3.683 vs8.45±2.533)表达明显增高;与模型组比较，Fas组(21.32±3.092)降低（均为P＜0.01）。 6、RT-PCR法测RhoAmRNA和RockmRNA表达:以β-actin为内参对照，结果以RhoAmRNA、RockmRNA与β-actinmRNA灰度值的比值表示。与空白组比较，模型组RhoAmRNA(1.36±0.068 vs0.51±0.046)、 RockmRNA(0.96±0.145 vs0.40±0.059)表达明显上调（均为P＜0.01）;与模型组比较，Fas组RhoAmRNA(0.69±0.129)、RockmRNA(0.56±0.104)明显下调（均为P＜0.01）。 结论：RhoA/Rock信号转导通路与ISO诱导大鼠心肌重塑中的发生、发展密切相关，阻滞RhoA/Rock信号转导通路可抑制TGF-β1和BNP表达水平，降低MD、CVF，减轻心肌纤维化。
心肌重塑;信号转导通路;异丙肾上腺素;分子机制
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
儿科学
路明
2013
中文
R542.202
56
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）