新型BRD4拮抗剂Ⅰ-BET对白血病细胞株增殖的抑制作用及其机制的探索
目的：本研究旨在通过分析新型BRD4拮抗剂I-BET对白血病细胞株（RS4;11、SHI-1、K562、SUP-B15、THP-1和HEL）细胞增殖、凋亡的影响，初步探讨其对白血病细胞株的抑制作用及相关的机制。 方法：1.体外培养伴有MLL突变的白血病细胞株（RS4;11和SHI-1），Ph阳性白血病细胞株（K562和SUP-B15），急性髓系白血病细胞株（THP-1和HEL）;2.白血病细胞株（RS4;11、SHI-1、K562、SUP-B15、THP-1和HEL）经不同浓度的I-BET(100 nmol/L、250 nmol/L、500 nmol/L、1000nmol/L、2500 nmol/L和5000 nmol/L)处理48小时、72小时后，CCK-8法检测其对细胞增殖抑制率的影响;3.白血病细胞株首先用三种不同I-BET浓度（RS4;11、K562、THP-1和HEL细胞经1μmol/L、2.5μmol/L和5μmol/L的I-BET处理;SUP-B15和SHI-1细胞经0.5μmol/L、1μmol/L和2.5μmol/L的I-BET处理）处理72小时，然后利用流式细胞术检测细胞凋亡的变化;4.白血病细胞株首先用三种不同I-BET浓度（RS4;11和K562细胞经1μmol/L、2.5μmol/L和5μmol/L的I-BET处理;SUP-B15和HEL细胞经0.3μmol/L、0.5μmol/L和1μmol/L的I-BET处理）处理48小时后，然后利用Western blot检测细胞中Bcl-2表达水平的变化。 结果：1.I-BET对白血病细胞株细胞增殖率的影响:I-BET能显著抑制RS4;11、SHI-1、SUP-B15、THP-1和HEL细胞的增殖，但对K562细胞的抑制作用不明显，I-BET对白血病细胞株的抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性;2.I-BET对白血病细胞细胞凋亡的影响:I-BET能诱导RS4;11、SHI-1、K562、SUP-B15、THP-1和HEL白血病细胞株的凋亡，并且呈剂量依赖性;3.I-BET处理后对细胞Bcl-2蛋白表达水平的影响:I-BET下调RS4;11、K562和HEL细胞中Bcl-2的表达，但SUP-B15细胞实验组和对照组未检测到Bcl-2的表达。 结论：1.I-BET除了对Ph阳性白血病细胞株(K562)的抑制效果差外，其可以抑制伴有MLL突变的白血病细胞株（RS4;11和SHI-1）、急性髓细胞白血病细胞株（HEL和THP-1）、Ph阳性白血病细胞株(SUP-B15)的增殖。2.I-BET能诱导RS4;11、SHI-1、SUP-B15、THP-1和HEL白血病细胞株的凋亡。I-BET下调了RS4;11、K562和HEL白血病细胞株中Bcl-2的表达，暗示I-BET可能通过下调Bcl-2的表达导致白血病细胞株凋亡;而SUP-B15细胞中未检测到Bcl-2的表达，暗示I-BET诱导白血病细胞凋亡的作用可能还有其他机制。
白血病;BRD4拮抗剂I-BET;细胞增殖;药理机制
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
内科学(血液病学)
徐开林;潘秀英
2013
中文
R733.7;R730.5
60
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）