慢性氟中毒大鼠发生学习记忆功能障碍的机制研究
目的：利用大鼠慢性氟中毒模型，进一步研究不同剂量氟对慢性氟中毒大鼠学习记忆功能的影响以及其可能的机制。 方法：取40日龄的Wistar系雄性大鼠64只，按照饮水含氟量随机分为4组，对照组:清洁饮用水，含氟量低于0.5 mg/L;低氟中毒组:饮水含氟化钠(NaF)量为50 mg/L，中氟中毒组:饮水含氟化钠量为100 mg/L，高氟中毒组:饮水含氟化钠量为150mg/L。饲养6个月以建立大鼠氟中毒模型。采用Y-型迷宫实验检测氟中毒大鼠模型的学习、记忆功能受损状况;采用硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量，亚硝酸盐法测定红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力水平，用氧化指标专用测试试剂盒测大鼠脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;通过苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠海马神经元的变化;通过细胞乙酰胆碱酯酶(AChE)活性荧光法定量检测胆碱酯酶的活性;通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫组织化学方法分别检测血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)的含量和观察氟中毒大鼠脑组织中MBP的表达。 结果：1.氟中毒组大鼠Y型迷宫的学习、记忆成绩低于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，各染氟组大鼠达到学习标准所需要的平均时间普遍长于对照组。 2.低、中、高氟中毒大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶活性分别为(1.3909±0.1013)、(0.6798±0.0771)、(0.4432±0.0554) U/mg，与正常对照组(2.0486±0.1031)U/mg比较或组间比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)，表明氟可透过血-脑屏障在大鼠脑组织内蓄积，进而抑制乙酰胆碱酯酶活性。 3.低、中、高氟中毒组血清MBP浓度分别为(4.61±0.39)、(6.03±0.17)、（7.72±0.16）ng/ml，明显高于正常组(3.35±0.22)ng/ml，其差异有统计学意义(P＜0.05)。免疫组化显示氟中毒组的大鼠海马区髓鞘着色变浅，且分布不均匀，髓鞘结构亦发生变化，较正常组层次紊乱，成空泡状，随着氟浓度的增大，染色越浅。MBP IOD测定显示，随着氟浓度的增大，累积光密度呈递减趋势。 4.低、中和高氟中毒大鼠脑组织中MDA的含量高于正常组，差异有统计学意义(P＜0.05);低、中和高氟中毒大鼠脑组织中GSH-Px的活力低于正常组，差异有统计学意义（P＜0.05）;低、中和高氟中毒大鼠脑组织中SOD的含量低于正常组，差异有统计学意义(P＜0.05)。 5.HE染色示慢性氟中毒组大鼠海马锥体细胞数量减少，神经元细胞水肿，细胞轮廓消失，细胞出现空泡，部分高氟组出现凋亡小体。 结论：1.慢性氟中毒可以导致大鼠出现学习、记忆功能受损。2.慢性氟中毒所致大鼠学习、记忆能力的降低可能与乙酰胆碱酯酶活性降低、氧化应激及中枢神经损伤有关。
学习记忆功能障碍;慢性氟中毒;乙酰胆碱酯酶活性;氧化应激;中枢神经损伤
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
神经病学
耿德勤;程言博
2013
中文
R749.6
64
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）