Akt和PEA-15在缺血后处理对抗全脑缺血再灌注损伤中的作用研究
目的;缺血后处理(ischemic postconditioning，IPost)能够减轻脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)诱导的神经功能损伤，是一种内源性保护脑缺血的新方法，但其保护机制尚不清楚。本研究旨在探索缺血后处理神经保护作用的分子机制，为治疗缺血性脑损伤提供新的思路。 方法:采用四动脉结扎(4-VO)法，雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠全脑缺血15min作为全脑缺血/再灌注损伤模型;在全脑缺血15min后的再灌注期内施行短暂全脑缺血3min作为缺血后处理。 第一部分Akt的选择性抑制剂Akt inhibitorⅣ在缺血后2h进行侧脑室注射。应用尼氏染色观察海马CA1区神经元的存活情况，采用免疫沉淀和免疫印迹检测蛋白质的相互作用和表达。 第二部分PEA-15 siRNA于缺血后1h定位注射至海马。应用尼氏染色观察海马CA1区神经元的存活情况，采用免疫印迹方法检测蛋白质的表达。 结果:第一部分1.Akt抑制剂Akt inhibitorⅣ消除了缺血后处理对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。2.Akt抑制剂Akt inhibitorⅣ消除了缺血后处理对Gluk2-PSD-95-MLK3信号复合体的抑制作用。3.Akt抑制剂Akt inhibitorⅣ解除了缺血后处理对MLK3-JNK3信号通路的抑制作用。 第二部分1.缺血后处理显著提高了全脑缺血再灌注24h大鼠海马CA1区PEA-15的表达水平。2.缺血后处理改变了由全脑缺血再灌注引起的PEA-15的表达变化。3.PEA-15 siRNA消除了缺血后处理对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。 结论:第一部分1.缺血后处理的神经保护作用是通过激活Akt来实现的。2.在缺血后处理过程中，激活的Akt通过抑制Gluk2-PSD-95-MLK3-JNK3信号通路来发挥神经保护作用。 第二部分1.缺血后处理能够调控全脑缺血再灌注损伤对PEA-15表达的影响。2.PEA-15介导缺血后处理对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。
全脑缺血再灌注损伤;缺血后处理;蛋白激酶B;PEA-15基因
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
生物化学与分子生物学
侯筱宇
2013
中文
R743;R741.02
56
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）