外源性硫化氢对d-半乳糖诱导的亚急性衰老大鼠血管老化的影响及机制
目的：观察亚急性衰老大鼠血管壁结构和功能的改变，探讨硫化氢(H2S)对血管老化的影响及其作用机制。 方法：健康雄性SD大鼠40只，随机分为对照组，D-半乳糖(D-gal)组，NaHS（H2S的供体）低剂量（1μmol·kg-1·d-1）、中剂量（10μmol·kg-1·d-1）、高剂量（100μmol·kg-1·d-1）组，每组8只。D-半乳糖组每日背部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg-1·d-1，连续8周;对照组每日背部皮下注射等体积生理盐水;NaHS组每日背部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg-1·d-1，连续8周，同时分别按1、10、100μmol·kg-1·d-1腹腔注射NaHS。HE染色、Masson染色法观察各组大鼠主动脉管壁厚度、管壁结构、弹性纤维及胶原纤维等形态学改变;硫代巴比妥酸(TBA)法和黄嘌呤氧化酶法测定大鼠主动脉超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及抗超氧阴离子含量;生化方法测定大鼠血清H2S浓度的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度的变化;免疫印迹法测定大鼠主动脉血管紧张素Ⅱ型1类受体(AT1R)蛋白、主动脉基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)及其组织抑制因子(TIMP-2、TIMP-1)蛋白的表达。 结果：H2S浓度检测结果:与对照组相比，D-半乳糖组大鼠血清H2S的浓度降低(P＜0.05);而给予NaHS预处理后，NaHS各剂量组大鼠血清H2S的浓度较D-半乳糖组明显升高（P＜0.05）。血清H2S浓度的增高能够改善D-半乳糖引起的亚急性衰老大鼠主动脉形态学的变化。HE染色结果中，对照组主动脉内膜较薄，结构完整，中膜平滑肌排列规则;D-半乳糖组主动脉内膜增厚、隆起，内皮细胞部分脱落，中膜明显增厚，平滑肌增生、紊乱;与D-半乳糖组相比，NaHS各剂量组内皮细胞脱落减少，平滑肌细胞增生减少。Masson染色结果表明:与D对照组相比，D-半乳糖组胶原纤维增多，平滑肌细胞增生(P＜0.05）;与D-半乳糖组相比，NaHS各剂量组胶原纤维减少，平滑肌细胞增生减少(P＜0.05)。ELISA检测结果显示:与对照组相比，D-半乳糖组大鼠血浆AngⅡ浓度明显升高(P＜0.05）;而给予NaHS预处理后，NaHS各剂量组大鼠血浆AngⅡ浓度较D-半乳糖组明显降低(P＜0.05)。与对照组相比，D-半乳糖组大鼠主动脉SOD活性下降、MDA含最升高、抗超氧阴离子含量降低（P＜0.05）;而给予NaHS预处理后，血管组织氧化应激水平得到明显改善:与D-半乳糖组相比，NaHS各剂量组主动脉SOD活性升高、MDA含量降低、抗超氧阴离子含量升高(P＜0.05）。免疫印迹法测定显示:与对照组相比， D-半乳糖组大鼠主动脉AT1R、MMP-2、MMP-9蛋白表达增加，TIMP-2、TIMP-1蛋白表达减少(P＜0.05);而与D-半乳糖组相比，NaHS各剂量组大鼠主动脉AT1R、MMP-2、MMP-9蛋白表达减少，TIMP-2、TIMP-1蛋白表达增加。 结论：外源性H2S预处理能够改善亚急性衰老大鼠主动脉形态学变化。H2S主要是通过降低血浆AngⅡ的浓度，下调主动脉AT1R蛋白的表达，增强血管组织抗氧化应激的能力;增加TIMP-2、TIMP-1蛋白的表达，抑制MMP-2、MMP-9蛋白的活性，调节MMPs/TIMPs的平衡，从而最终降低衰老大鼠血管的僵硬度，减少血管重塑，延缓血管老化的发生。
血管老化;硫化氢;调节机制
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
内科学(心血管病)
闫长栋;夏勇
2013
中文
R543
63
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）