YB1介导GOLPH3对脑胶质瘤细胞迁移和侵袭作用的研究
目的：研究Golgi phosphoprotein3(GOLPH3)对脑胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响，并探讨其可能的作用机制。 方法：1.Western blot检测GOLPH3和YB1蛋白在非瘤脑组织与各级别胶质瘤组织标本中表达情况，了解GOLPH3和YB1与脑胶质瘤发生的相关性及两蛋白间的相关性;2.分别应用细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测GOLPH3对脑胶质瘤U251细胞迁移和侵袭能力的影响;3.Western blot检测下调或过表达GOLPH3后，GOLPH3和YB1在胶质瘤U251细胞中的水平，了解GOLPH3对YB1的调节作用;4.采用Rapamycin和INK128抑制mTOR活性后，Western blot检测GOLPH3和YB1在胶质瘤U251细胞中的水平，明确YB1是否处于mTOR的下游;5.Western blot检测过表达GOLPH3并抑制mTOR活性后，GOLPH3和YB1在胶质瘤U251细胞中的水平，明确抑制mTOR活性是否能取消GOLPH3的作用;6.用siRNA下调YB1，检测其对胶质瘤细胞的侵袭迁移作用，明确是否与抑制mTOR活性以及下调GOLPH3的作用类似，并用明胶酶谱实验检测MMP-2活性。 结果：1.GOLPH3和YB1蛋白在非瘤脑组织与各级别胶质瘤组织标本中均有表达，但脑胶质瘤GOLPH3和YB1蛋白水平明显高于非肿瘤脑组织，并且其水平随着胶质瘤恶性级别的升高而升高;两蛋白之间存在显著相关性;2.与阴性对照组相比，下调GOLPH3后抑制脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭;过表达GOLPH3可促进脑胶质瘤细胞的迁移、侵袭;3.与阴性对照组相比，下调GOLPH3抑制YB1的表达;过表达GOLPH3促进YB1的表达;4.与阴性对照组相比，应用INK128抑制mTOR活性后，抑制脑胶质瘤U251细胞的迁移和侵袭，且下调YB1的表达。而应用Rapamycin抑制mTOR活性后，无明显变化;5.与对照组相比，过表达GOLPH3可增加U251细胞迁移和侵袭能力，而应用INK128抑制mTOR的活性可逆转GOLPH3的作用;6.与对照组相比，下调YB1后抑制脑胶质瘤U251细胞的迁移和侵袭，并降低MMP-2活性，但对GOLPH3蛋白水平无影响。 结论：脑胶质瘤细胞中GOLPH3通过YB1调节细胞的迁移和侵袭。
脑胶质瘤;细胞迁移;细胞侵袭;GOLPH3基因;YB1蛋白;调节机制
徐州医科大学;徐州医学院
硕士
外科学(神经外科学)
于如同
2013
中文
R739.41;R730.23
70
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）