携带blaNDM-1基因肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制的研究
目的：讨携带NDM-1基因肺炎克雷伯菌耐药机制、分子生物学特性和blaNDM基因的转移和传播机制。 方法：使用VITEK-32全自动细菌分析仪进行菌种鉴定，纸片扩散法测定菌株对抗生药物的敏感性，用E-test方法重新测定细菌对各类抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型的筛选;三维试验检测AmpC酶;EDTA-Etest试纸条协同试验检测金属酶;用PCR扩增TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-9、KPC-1、KPC-2、GES、IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2、SPM-1、DHA、CMY、ompK35、ompK36和NDM-1基因，并对阳性基因进行测序分析确定其基因型;用脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型分析细菌的同源性;质粒接合试验和转化试验验证NDM-1基因是否位于质粒上。 结果：2011年1月-2012年6月共收集到27株耐碳青霉烯类抗生素的肺炎克雷伯菌，发现2株肺炎克雷伯菌携带有NDM-1基因。其中肺炎克雷伯菌KP12还同时携带有SHV-1基因;肺炎克雷伯菌KP18同时携带有TEM-1、SHV-12和CTX-M-14基因，以及还携带有氨基糖苷类抗菌药物16S rRNA甲基化酶armA基因。肺炎克雷伯菌KP12和KP18多位点序列分型分别为ST15和新序列型ST1031。脉冲场凝胶电泳显示2株细菌为不同克隆型。接合试验显示肺炎克雷伯菌KP12接合成功，而肺炎克雷伯菌KP18未接合成功。2株细菌耐药质粒经转化试验均成功转入至大肠埃希菌DH5a。 结论：在我国内陆地区，首次发现2株肺炎克雷伯菌携带NDM-1基因，该NDM-1基因都位于70kb的质粒上，提示两株细菌携带的NDM-1可能在类似的质粒间传播，且患者都无国外旅行史。
肺部感染;克雷伯菌;细菌耐药;临床药理
南昌大学
硕士
临床检验诊断学
胡龙华
2013
中文
R563.1;R969
51
2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）