犊牛与成年牛卵泡液差异蛋白质组学分析
幼畜体外胚胎培养体系(JIVET)对于充分挖掘优良母畜的生产潜能具有重要意义，不仅有助于加快遗传改良的进程，而且对于商品化胚胎生产也是具有重大的推动作用。犊牛卵母细胞体外发育能力远低于成年牛，卵泡液是卵母细胞生长发育的微环境，卵母细胞体外发育潜能与卵泡液中蛋白成分紧密相关。本研究以超数排卵后犊牛和成年牛卵泡液为研究对象，利用基质辅助激光解离串联时间质谱技术(MALDI-TOF MS)对卵泡液中多肽进行差异分析，并利用双向电泳技术对卵泡液蛋白质组学进行差异蛋白比较。通过这两种技术对卵泡液中蛋白质组学进行全面分析，试图找到与卵母细胞生长发育相关的关键多肽和差异蛋白，为犊牛卵母细胞体外培养体系的完善奠定理论基础。本试验的研究结果总结如下。
1.采用基质辅助激光解离串联时间质谱技术(MALDI-TOF MS)对新鲜卵泡液多肽成分进行分析。分别成功构建了两组卵泡液的质谱多肽信号峰模型图谱;在成年牛组中出现30-40个信号峰，犊牛中有60-80个;其中成年牛卵泡液有2个特有信号峰，核质比分别为1218.58(m/z)和1509.77(m/z)，犊牛有1个特有信号峰，核质比为953.54（m/z）;利用MASCOT库对获得卵泡液中多肽进行对比，成年牛组发现有18种蛋白，犊牛组有11种蛋白，其中仅有1种共有蛋白是牛晶体结构修饰纤维蛋白A链。
2.采用双向电泳技术对犊牛和成年牛卵泡液中蛋白质组学分析。采用24cm胶条，上样量350微克，在pH4-7范围内成功构建出犊牛和成年牛卵泡液蛋白质组学图谱，犊牛卵泡液图谱中存在319个蛋白点，成年牛338个蛋白点。对差异蛋白点进行质谱技术鉴定，结果表明:成年牛卵泡液中存在1个表达量低于犊牛的蛋白点为肿瘤坏死因子α，犊牛中存在3个表达量低于成年牛蛋白点，分别为转铁蛋白、卵母细胞成熟因子mos、BCL2L12。
本文总结:(1)对犊牛与成年牛卵泡液中多肽信息差异进行分析，仅发现一个共有蛋白，即牛晶体结构修饰纤维蛋白A链;(2)在对卵泡液差异蛋白分析中，成功鉴定出了4种蛋白，分别为转铁蛋白、卵母细胞成熟因子mos、BCL2L12和肿瘤坏死因子α。
犊牛;成年牛卵泡液;MALDI-TOF-MS;双向电泳;差异蛋白;卵母细胞
广西大学
硕士
动物遗传育种与繁殖
韦英明;陆凤花
2013
中文
S814.4;S823.31
58
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）