马褂木遗传多样性研究
本文对采自广西分布区内全州县安和乡、乐业县雅长乡、资源县两水乡、环江县明伦镇、融水县安太乡和老堡乡共6个自然种群样本和广西咸水林场和高峰林场的种源试验林中保存的9个种源（湖南步城、安徽休宁、江西庐山、湖北利川、福建武夷山、广西全州、贵州黎平、云南金平、浙江安吉）的样本通过ISSR分子标记技术进行遗传多样性研究，得到以下结论:
(1)比较两种马褂木DNA提取方法，CTAB法与植物基因组试剂盒提取法，用植物试剂盒提取的DNA从质量、纯度、琼脂糖凝胶凝胶电泳结果、稳定性等方面都优于CTAB法。
(2)确定最终马褂木ISSR-PCR扩增体系，最终ISSR-PCR扩增体系:总体积20μL中含有10×buffer为2.0μL、MgCl2浓度为1.8 mmol/L、dNTPs终浓度为0.2 mmol/L、引物终浓度为0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1U、DNA模板60 ng。
最终的PCR扩增程序:94℃预变性5 min，94℃变性1min，N℃退火45 s，72℃延伸2 min，45个循环，72℃完全延伸7 min，4℃保存。
(3)引物筛选:可以扩增出较为清晰的引物为UBC-807、UBC-809、UBC-816、UBC-817、UBC-818、UBC-825、UBC-826、UBC-829、UBC-839、UBC-847、UBC-849、UBC-850、UBC-851、UBC-854、UBC-878、UBC-880、
UBC-881、UBC-887、UBC-889、UBC-890、UBC-891、本实验的PCR扩增从上述引物中选出10条最清晰的多态性高的引物分别为UBC-807、UBC-818、UBC-825、UBC-826、UBC-829、UBC-847、UBC-881、UBC-889、UBC-890、UBC-891。
(4)全州县安和乡、乐业县雅长乡、资源县两水乡、环江县明伦镇、融水县安太乡和老堡乡共6个自然种群的遗传多样性分析结果:共扩增出125个清晰的位点，其中有多态性的为122个，多态性百分率为97.60％;其中融水安太乡的遗传多样性水平最高;6个自然群体间总的遗传变异中有29.10％来自种群间，而种内遗传变异70.90％，根据UPGMA聚类分析，马褂木自然群体主要分为两类，一类是环江和融水安太乡、雅长，另一类是全州和融水老堡乡、资源。
(5)种源试验林中保存的湖南步城、安徽休宁、江西庐山、湖北利川、福建武夷山、广西全州、贵州黎平、云南金平、浙江安吉9个种源样本的遗传多样性分析结果:共扩增出126个清晰的位点，其中有多态性的为123个，多态性百分率为97.62％;其中湖北利川的遗传多样性水平最高;9个种源群体间总的遗传变异中有25.37％来自种群间，而种内遗传变异74.63％，根据UPGMA聚类分析，北部地区与南部地区可分为两大类，南部地区又可大致细分为西部地区，中部地区和中东部地区。
(6)根据广西分布区自然群体和种源试验保存的种源样本的多样性分析，提出了中国马褂木种质资源保存的策略和措施。
马褂木;ISSR分子标记;聚类分析;遗传多样性
广西大学
硕士
林木遗传育种
黄寿先
2013
中文
S792.21;S722.7
71
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）