河豚卵巢源红酵母产类胡萝卜素的研究
类胡萝卜素是一类广泛分布于动物、植物及微生物的重要天然色素类物质，具有抗氧化、防衰老、皮肤保护、预防肿瘤和心血管疾病等重要生理功能，被认为是最具潜力的双功能色素。本论文从河豚鱼卵巢中分离出一株红酵母，并对该酵母所产色素进行了提取、分离纯化及结构鉴定。主要研究内容及结果如下:
1.对来自野生河豚鱼卵巢及肝脏的微生物进行分离，从卵巢中筛选到一株橘红色的菌株TL-3。该菌株菌落较大、橘红色、表面光滑、湿润，革兰氏阳性，菌体细胞呈卵圆形;酵母鉴别染色观察到其含有子囊孢子;PCR扩增该菌株IST序列，经序列同源性比对分析，该菌株与红酵母属(Rhodotorula sp.)相似度达99％。根据菌株的菌落形态特征观察和生理生化试验，以及26S rDNA序列分析，鉴定该菌株为红酵母。
2.对该菌株产类胡萝卜素的培养基及培养条件进行了初步研究，发现其生长所需营养要求低，培养基组成对菌体生长及类胡萝卜素合成的影响较小;光照、温度、pH等培养条件是类胡萝卜素合成的主要影响因素。类胡萝卜素提取的最佳培养条件为:蔗糖2％，蛋白胨0.6％，酵母膏0.3％，NaCl1％，pH7.2，20℃，160 rpm，避光，培养84 h，在此条件下，菌体生物量为12.2 g/L，类胡萝卜素总产量为2.62 mg/L。
3.对该菌株所产色素进行了提取、分离及结构鉴定研究。比较了四种常用的酵母细胞破碎方法，确定酸热破壁法提取该菌体色素的效率较高，采用硅胶柱色谱分离菌体色素的分离效果较好。应用类胡萝卜素特征化学实验、薄层色谱法、紫外可见分光光度法、红外扫描及HPLC和核磁共振法进行色素的性质及结构鉴定。结果表明，该酵母色素主要含有四种类胡萝卜素组分，其中两种分别为β-胡萝卜素和番茄红素。
4.研究了酸热法提取酵母色素的条件及色素的稳定性。研究发现酸浓度、酸浸泡时间、热处理时间及提取溶剂是影响色素提取效果的主要因素，类胡萝卜素的最佳提取条件为:3M盐酸浸泡1h，热处理6 min，以石油醚/丙酮(2∶3)为溶剂，35℃提取30 min。该酵母色素对光、温度和氧敏感，保存在极性较低的石油醚中稳定性较好。
类胡萝卜素;河豚卵巢;红酵母;分离纯化;结构鉴定
南昌大学
硕士
生物化工
陆豫;余勃
2013
中文
O629.4
80
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）