氯丙嗪通过调节BKCa钾通道对局灶性脑缺血损伤具有保护作用
脑中风因其高发病率、高致残率、高死亡率等特点，成为继心血管疾病和癌症之后的世界第三大死亡原因，严重危害人类的健康。每年世界范围内约有570万人死于急性脑中风，并有不断上升的趋势。虽然脑缺血的病理生理学研究已取得了巨大进步，但目前国内外除溶栓治疗外尚无非常有效的治疗措施。因此寻找发挥神经保护作用的药物具有十分重要的意义。
氯丙嗪是临床上常用的吩噻嗪类抗精神病药物，易于透过血脑屏障，具有多种药理活性，与许多受体和离子通道的关系密切。我们之前的研究发现在全细胞记录模式下，氯丙嗪可激活大电导钙激活钾通道（BKCa通道）。而越来越多的研究发现BKCa通道的激活剂可以保护脑缺血损伤，阻止神经元去极化，减少兴奋性神经递质的释放和脑梗死体积等。因此本实验运用膜片钳、大脑中动脉阻塞模型和脑立体定位注射等实验方法，从细胞和动物水平对氯丙嗪在脑缺血损伤中是否具有保护作用以及其发挥作用的机制进行探讨。
在单通道水平，我们证明氯丙嗪可以浓度依赖性的激活BKCa通道。其激活作用是通过增加单通道的开放概率而不是增加单通道电导。在细胞浴液中加入20μM的氯丙嗪之后，其通道的开放概率从3.6±1.3％增加到13.7±0.7％。从氯丙嗪对BKCa通道开放概率的影响随着钳制电压变化的结果中可以看出，与对照组相比氯丙嗪组在每个钳制电压下，通道的开放概率都有所增加，并且氯丙嗪对BKCa通道的激活作用并不改变BKCa通道的电压依赖性。
在局灶性脑缺血MCAO模型实验中，氯丙嗪不同剂量组在造模成功之后立刻给药，然后在缺血24小时之后观察脑梗死体积情况，发现氯丙嗪5 mg/kg,10mg/kg,20 mg/kg可以明显减少局灶性脑缺血的梗死体积。其梗死体积百分比从对照组的23.79±1.38％依次减少到14.80±2.62％、13.89±1.32％和17.10±2.51％。氯丙嗪按10 mg/kg剂量在栓塞成功1hr之后给药，发现仍然可以使脑梗死体积比从23.79±1.38％减小到18.96±1.65％，但其梗死体积的减少量与栓塞之后0hr给药相比有明显下降。因此说明氯丙嗪可以剂量依赖性和时间依赖性地减小SD大鼠局灶性脑缺血的梗死体积，对脑缺血损伤具有保护作用。而当对造模后的SD大鼠同时注射氯丙嗪和BKCa通道的特异性阻断剂时，动物脑缺血的梗死体积与对照组相比无明显差异，说明BKCa通道的特异性阻断剂阻断了氯丙嗪对脑缺血损伤的保护作用。
综上所述，在一定时间窗口内，氯丙嗪对局灶性脑缺血损伤具有保护作用，而这种保护作用是通过激活BKCa通道实现的，提示氯丙嗪有望成为治疗脑中风的潜在药物。
脑中风;氯丙嗪;钾通道;局灶性脑缺血;动物模型
厦门大学
硕士
微生物学
戚智
2013
中文
R743.31
58
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）