维生素C对BKCa通道的激活作用研究
维生素C又名L-抗坏血酸，抗坏血酸盐，是高等灵长类动物和其他少数生物的必需营养元素。它是一种水溶性维生素，易溶于水，形成轻度的酸性溶液。在生物体内，维生素C是一种有效的抗氧化剂，能够保护身体免于氧化剂的威胁。同时维生素C也是一种辅酶，参与体内的多种酶促反应。BKCa通道是大电导-钙离子激活的钾通道的简称，它的分子结构由四个α亚基和四个β亚基组成，每个α亚基结合一个β亚基之后再形成BKCa通道的四聚体结构，其广泛表达于各种组织与细胞中，它可由胞内钙离子浓度增加和细胞膜去极化而激活，具有重要的生理功能。在本研究论文拟通过膜片钳技术和基因转染技术，研究维生素C对CHO细胞中表达的BKCa通道开放的影响，并探究其作用机制。获得如下三项结果:
(1)维生素C对BKCa通道的激活作用。
利用膜片钳inside-out记录模式我们发现维生素C可激活BKCa通道，增加其开放概率，这种激活作用可分为短时程快速激活与长时程慢速激活两种作用模式。短时程快速激活由维生素C的弱酸性引起，在Hepes缓冲液中约25秒后逐步消失。快速激活作用消失后，还有一个长时程慢速激活作用。
(2)维生素C对BKCa通道的长时程慢速激活作用。
将维生素C溶液调节为生理PH值(7.4)，使之与细胞外液的PH值保持一致。维生素C对BKCa通道的瞬间激活作用消失，50μM的维生素C对BKCa通道的慢速激活不起作用，200μM，500μM，1000μM的维生素C均可激活BKCa通道的开放，且随着时间的延长，通道的开放概率逐步增大至稳定状态。
(3)维生素C可浓度依赖性地激活BKCa通道的开放。
通过本实验证实，维生素C可以激活BKCa通道的开放，这对深入了解维生素C的生理功能，为治疗可能以BKCa通道为靶点的疾病提供了依据。
BKCa通道;CHO细胞;维生素C;膜片钳;基因转染
厦门大学
硕士
微生物学
戚智
2013
中文
R96
54
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）