苍艾挥发油对肺气虚证大鼠免疫调节作用的研究
苍艾挥发油是导师临床效验方基础上提炼制成的挥发油复方制剂，前期研究表明苍艾挥发油对金葡菌、甲型肺炎链球菌、乙型链球菌等AURI常见菌株有较为明显的抑制作用，鼻腔吸入给药能有效提高小鼠唾液中SIgA的含量，保护上呼吸道免受大气中烟尘损害，预防上呼吸道感染。在上述理论和前期工作的基础上，本课题针对苍艾挥发油经鼻和灌胃给药对肺气虚型大鼠免疫调节作用进行了深入的实验研究。
目的：研究苍艾挥发油对肺气虚大鼠免疫功能的影响和作用机制，以期为临床使用相关药物治疗肺气虚证提供指导。
方法：⑴通过收集既往肺气虚证动物模型造模方法资料，选择两种常用的肺气虚证动物模型（即“简易烟熏法”和“LPS+烟熏法”）进行复制，并通过客观诊断指标的比较，从中筛选出敏感度高、重现性好的肺气虚证动物模型。⑵研究苍艾挥发油灌胃与经鼻给药两种给药方式对大鼠肺气虚模型的免疫调节作用:复制大鼠肺气虚模型并同时给予苍艾挥发油，在造模完成后第31天，取出大鼠血清、肺脏和咽部组织，应用ELISA法检测大鼠血清中的IgE、TNF-α、IFN-γ、IL-1β的含量，应用流式细胞技术测定T细胞亚群，对肺脏和咽部组织进行病理形态学观察。
结果：①根据2002年《中药临床研究指导原则》肺气虚证的诊断标准，简易烟熏组和LPS+烟熏组与正常组相比较，肺气虚的阳性症状和体征都非常明显（P＜0.01），其中LPS+烟熏组的阳性症状和体征比简易烟熏组更为显著（P＜0.01);模型组咽部及肺组织病理改变较正常组明显，简易烟熏组和LPS+烟熏组的肺组织病理切片，皆可见炎性细胞浸润， LPS+烟熏组还出现了肺泡间隔增宽，肺大泡形成，小血管扩张的病理改变。②模型组CD4+比例与正常对照组相比，明显下降，具有统计学意义(P＜0.05)，苍艾挥发油灌胃给药和滴鼻给药能有效调节肺气虚证大鼠全血中T淋巴细胞亚群的比例，使T淋巴细胞亚群的比例接近正常值。③模型组IFN-γ含量与正常对照组相比明显降低(P＜0.05，P＜0.01);苍艾挥发油灌胃及滴鼻的高、中剂量组与相应模型组相比， IFN-γ含量均有明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）;④模型组IL-1β含量与正常对照组相比，明显升高(P＜0.01，P＜0.05);苍艾挥发油灌胃高、中、低剂量组与模型组相比，IL-1β含量均有降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）;苍艾挥发油滴鼻高、中剂量组与模型组相比，IL-1β含量降低，差异具有统计学意义(P＜0.05);⑤模型组TNF-α的含量与正常对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05);苍艾挥发油灌胃及滴鼻的高、中、低剂量组与相应模型组相比较，TNF-α的含量差异均无统计学意义（P＞0.05）;⑥模型组IgE的含量与正常对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）;苍艾挥发油灌胃及滴鼻的高、中、低剂量组与相应模型组相比较，IgE的含量差异均无统计学意义（P＞0.05）;⑦病理切片观察结果证实:苍艾挥发油预防给药滴鼻高、低剂量组和灌胃高、低剂量组咽部黏膜的炎症细胞明显较模型组减少，充血水肿的状况也明显减轻;通过肺组织的病理结果可看出，苍艾挥发油滴鼻高剂量组和灌胃高剂量组能有效地减少肺泡壁炎细胞的浸润，改善肺组织的充血状况，修复被破坏的黏膜组织。
结论：⑴简易烟熏模型组、LPS+烟熏模型组与正常对照组相比较，肺气虚证阳性症状体征积分和肺部及咽部的病理改变均有显著差异，说明造模成功。其中LPS+烟熏模型组与简易烟熏模型组比较，肺气虚证阳性症状更为明显，并且LPS+烟熏模型组的病理切片较简易烟熏模型组出现了肺气肿的病理改变。LPS+烟熏组更符合肺气虚证的诊断指标，可作为本研究肺气虚证动物模型的造模方法。⑵苍艾挥发油能有效改善肺气虚型大鼠T细胞亚群CD4+/CD8+的比值，能促进细胞免疫的调节作用;⑶苍艾挥发油能有效提高肺气虚型大鼠血液中IFN-γ的含量;⑷苍艾挥发油可降低I L-1β的含量，有效抑制肺气虚型大鼠的炎症反应;⑸苍艾挥发油能有效地抑制肺气虚证大鼠肺部和咽部粘膜的炎症反应;⑹苍艾挥发油灌胃给药与滴鼻给药同样有效，两种给药方式的优异性还待进一步进行研究。
肺气虚证;中药治疗;苍艾挥发油;实验药理
云南中医学院
硕士
中医儿科学
熊磊
2013
中文
R256.105;R285.5
54
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）