JNK/MCP-1/ERK/CREB信号通路介导姜黄素缓解Ⅱ型糖尿病神经痛大鼠的实验研究
目的:观察姜黄素、JNK抑制剂、姜黄素复合MCP-1对Ⅱ型糖尿病神经病理性疼痛模型（DNP）大鼠机械痛敏(MWT)、热痛敏(TWL)和脊髓背角、背根神经节(DRG)中p-ERK和p-CREB表达的影响，探讨姜黄素治疗神经病理性疼痛的相关机制。
方法:高脂高糖饲料喂养SD大鼠8周诱导胰岛素抵抗后，继以单次小剂量链脲佐菌素(STZ)35mg/kg腹腔注射，3d后血糖≥16.7mmol/l者入选为Ⅱ型糖尿病大鼠（M组）。在注射STZ前(pre-14)和14d后(T0)MWT、TWL低于基础值85％以下的大鼠视为Ⅱ型糖尿病神经病理性疼痛大鼠，将其随机分为6组(n=27):Ⅱ型糖尿病神经病理性痛组（DNP组）、DNP+姜黄素组（Cur组）、DNP+玉米油组（S组）、DNP+JNK抑制剂组（J组）、DNP+DMSO（JS组）、DNP+姜黄素+MCP-1组（CM组）。Cur组、SC组于分别腹腔注射姜黄素和玉米油100mg/kg(25 mg/ml)，J组和JS组分别鞘内注射JNK抑制剂5μg和DMSO10μl，DCM组腹腔注射姜黄素100 mg/kg后，鞘内注射MCP-110 ng，1次/d，连续14天。DNP组不做任何处理。另取27只为正常对照组（C组），给予普通饲料喂养。给姜黄素3、7、14d后(T1、T2、T3)测血糖、MWT与TWL，并在同时间点取大鼠L4-6脊髓和背根神经节(DRG)，用免疫组化和免疫印迹法测定脊髓背角和背根神经节中p-ERK和p-CREB的表达。
结果:
1.大鼠体重、血糖、胰岛素浓度及胰岛素敏感指数的变化:与C组相比，高糖高脂饲养8周后M组大鼠血糖水平明显增高但未达到糖尿病诊断标准（C组3.6±0.4 mmol/L，M组5.4±1.3mmol/l）(P＜0.05)，空腹胰岛素浓度也明显升高（C组13.37±3.89 mIU/L，M组16.88±4.47 mIU/L）（P＜0.05），胰岛素敏感指数明显下降（C组-3.89±0.51，M组-4.51±1.59）(P＜0.05)。
2.药物对MWT、TWL的影响:
造模前各组MWT、TWL基础值无差别（C组43.6±2.3、13.67±2.43;DNP组42.2±3.4、13.83±0.83;Cur组41.7±5.5、14.21±1.32;SC组41.4±3.3、12.91±1.44）。与C组相比，造模后DNP组、Cur组、S组、J组、JS组和CM组MWT降低、TWL缩短(P＜0.05);与DNP组相比，Cur组和J组在T2、T3时间点MWT明显升高、TWL明显延长(P＜0.05);CM组在T1、T2、T3时间点MWT降低、TWL缩短(P＜0.05);S组、JS组和DNP组相比，给药后各时间点MWT、TWL差异无统计学意义。
3.脊髓背角及DRG p-ERK、p-CREB蛋白表达的变化:
本实验中，C组大鼠脊髓背角和DRG p-ERK、p-CREB蛋白仅有少量表达。造模后，与C组相比，DNP组、Cur组、S组、J组、JS组、CM组脊髓背角及DRG p-ERK、p-CREB蛋白表达明显增多(P＜0.05)。在T2时间点，Cur组脊髓和DRG、DJ组DRG中p-ERK、p-CREB蛋白表达均低于DNP组(P＜0.05)。在T3时间点、Cur组和J组脊髓和DRG中p-ERK、p-CREB蛋白表达均低于DNP组(P＜0.05)。S组、JS组、CM组与DNP组p-ERK、p-CREB蛋白表达基本一致，无统计学差异。
4.脊髓背角及DRG p-ERK、p-CREB阳性细胞表达的变化:
C组大鼠脊髓背角浅层及DRG仅有少量p-ERK、p-CREB阳性细胞表达。造模后，DNP组、Cur组、S组、J组、JS组和CM组大鼠脊髓背角和DRG的p-ERK、p-CREB阳性细胞表达显著多于C组(P＜0.05)。在T3时间点，Cur组和J组大鼠脊髓背角和DRG p-ERK、p-CREB阳性细胞表达表达均低于DNP组(P＜0.05)。S组、JS组、CM组p-ERK、p-CREB阳性细胞表达与DNP组基本一致，无统计学差异。
结论:DNP大鼠脊髓背角和DRG p-ERK、p-CREB表达增多;腹腔注射姜黄素或鞘内注射JNK抑制剂能有效缓解糖尿病神经病理性疼痛的发展，腹腔注射姜黄素的同时鞘内注射MCP-1加重了DNP大鼠的热痛敏和机械痛敏，姜黄素抗DPN机制可能与姜黄素抑制JNK/MCP-1/ERK/CREB信号通路在脊髓背角及DRG的活化有关。
Ⅱ型糖尿病;神经病理性疼痛;姜黄素;JNK抑制剂;MAPK/ERK信号通路
温州医科大学;温州医学院
硕士
麻醉学
曹红
2013
中文
R33-33;R587.1
47
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）