不同逆境土壤油菜富集分离筛选促生抗病抗逆根际微生物的研究
利用油菜作为细菌定植的宿主，循环富集不同逆境环境植物根际的微生物，分别从湖北大冶重金属污染土壤、江西湖口有机污染土壤、湖北荆门石油污染土壤和江苏启东盐碱土分离到110，139，141和228株细菌菌株。
体外抑制油菜菌核菌实验表明各种土壤分离的细菌，分别有15.5％，15.1％，36.2％，24.6％的细菌具有抑制油菜核盘菌生长的能力。随机挑选了414株细菌，做产生1-氨基环丙酮羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid，ACC）脱氨酶鉴定，约有18％的细菌含有ACC脱氨酶。
挑取12株具有很强的抑制油菜核盘菌的细菌，其中5株含有ACC脱氨酶，检测其ACC脱氨酶活性。对12株细菌进行16s rDNA测序，构建系统进化树，鉴定菌属。并检测抗生素合成基因，以及测序构建进化树，确定细菌种类。研究发现主要是假单胞菌（Pseudomonas sp.），芽胞杆菌（Bacillus sp.）和氧化烃微杆菌（Micobacterium hydrocarbonoxydans）三类细菌。发现5株含ACC脱氨酶分别是P.brassicacearum TY1205,P.brassicacearumTY1210和P.brassicacearum KY5404,以及P.fluorescens TY3101，KY3201。P.protegens KY1502和TY1508具有2，4-二乙酰基间苯三酚(2，4-DAPG)合成关键基因phlD和藤黄绿脓菌素(Plt)合成关键基因pltC。这些细菌与模式菌株Pseudomonas protegens Pf-5和Pseudomonasbrassicacearum Q8r1-96在基因水平上非常相似。
根延长实验中所有P.brassicacearum和两个P.protegens KY1502和TY1508都能很好地促进生长。结合5株ACC脱氨酶细菌的重金属最小抑菌浓度和盐最小抑菌浓度实验，以及所有细菌解磷实验，显示ACC脱氨酶细菌具有较强的逆境耐受能力和逆境条件下促进植物生长的潜力。解磷实验结果显示，逆境来源的细菌都具有较好解磷效果，这些细菌在逆境土壤中对改善土壤肥力，促进逆境植物对磷的有效吸收具有潜力。挑选出的6株促进生长性能和体外抑制油菜核盘菌的细菌，进行温室生物防治实验。最后确定P.brassicacearum KY5404具有稳定的抑制油菜菌核病的能力，同样前面的实验证明了其显著的促进油菜生长，还具有ACC脱氨酶活性，可用于生物防治研究。
逆境土壤;根际微生物;油菜核盘菌;ACC脱氨酶活性;生物防治;逆境耐受
华中农业大学
硕士
微生物学
张吉斌
2013
中文
S435.654;S476.11
83
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）