奶及奶制品鉴别方法的研究
本研究分别从蛋白质水平和DNA水平对奶及奶制品的鉴别方法进行了研究，其鉴别和检测方法如下:
1、以5种不同品牌纯牛奶、骆驼奶、水牛奶、牦牛奶、羊奶和豆浆为研究对象，运用SDS-PAGE法电泳，银染后的蛋白图谱与微流体芯片电泳法进行了比较，从两种电泳方法的凝胶图上可以看出5种纯牛奶的蛋白质电泳图相同。采用SDS-PAGE法鉴别时，骆驼奶、豆浆可以有效地区分开，但牛奶、羊奶、水牛奶、牦牛奶不易区分开。运用微流体芯片电泳，在有效地对骆驼奶和黄豆浆进行区分外，还能对牛奶、牦牛奶、羊奶和骆驼奶也进行一定程度的区分。两种方法的灵敏度相近，但是微流体芯片电泳的优势在于其快速、准确和高效。
2、采用了PCR法对牛奶、羊奶、水牛奶、骆驼奶和豆奶进行了鉴别，其中，牛奶和骆驼奶均以cytb为目的基因，分别扩增出大小为725 bp和363 bp的DNA片段，羊奶以ATP6为目的基因，能扩增出大小为292 bp的DNA片段，水牛奶以12SrRNA为目的基因片段，能扩增出大小为328 bp的DNA片段，黄豆浆以cytf为目的基因，扩增出大小为510 bp的DNA片段，各引物对对于其它物种无非特异性扩增，同时，采用了两种限制性内切酶验证该扩增的特异性。依据物种之间基因序列的差距设计的引物，能够同时对这几种液态奶鉴别，是一种简单、可靠的液态奶鉴别方法。
3、对于同源性较强的牛、水牛和牦牛，以12SrRNA为目的基因片段，设计其通用性引物，牛和牦牛能扩增出长度为375 bp的DNA片段，水牛能扩增出大小为376 bp的片段。对于牛奶和水牛奶的鉴别，采用Msap1Ⅰ进行酶切反应，牛的PCR产物能别切割成大小为90 bp和285 bp的片段，水牛的PCR产物能别切割成大小为91 bp、141 bp和144 bp的DNA片段，但对于牛和牦牛的鉴别，采用的是Msap1Ⅰand PacⅠ双酶切反应，牛PCR产物的酶切片段为90 bp和285 bp，牦牛的PCR产物酶切片段为82 bp、90 bp和203 bp。PCR-RFLP能有效地对牛奶、水牛奶和牦牛奶进行鉴别，并且能对水牛奶和牦牛奶中掺杂牛奶进行检测，其掺假检测限至少能达到5％。
4、本部分主要是采用荧光定量PCR的方法对牛奶、水牛奶、牦牛奶、羊奶和骆驼奶进行了研究。通过设计牛的特异性引物和特异性探针，能够快速、准确的对牛奶进行鉴别研究，同时也为哺乳动物奶掺杂牛奶的鉴别提供了依据。
奶;奶制品;鉴别方法;荧光定量PCR法
北京化工大学
硕士
化学工程与技术
张栩
2013
中文
TS252.7
89
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）