IL-2与IL-7基因对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的协同免疫增强作用
犬细小病毒病是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。目前对该病尚无有效的治疗药物，主要通过接种弱毒疫苗进行预防。但接种弱毒疫苗后易出现亚临床感染或弱毒苗毒力返强等现象，近年来，DNA疫苗受到国内外学者的广泛关注，因为它既可以诱导体液免疫应答又可以诱导细胞免疫应答。然而DNA疫苗的免疫水平相对比较低，选择适当的DNA疫苗佐剂来加强DNA疫苗的免疫原性具有非常重要的意义。细胞因子表达载体作为DNA疫苗佐剂，因具有释放缓慢、作用时间持久和佐剂作用强等特点而被广泛应用。
IL-2作为生物佐剂已被广泛应用于DNA疫苗和亚单位疫苗的研究。近年来，IL-7被认为是一种潜在的细胞因子生物佐剂，本实验室曾经用cIL-7作为CPVVP2的免疫佐剂免疫小鼠，证实cIL-7对免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫都有明显的促进作用。为了解cIL-7与cIL-2在增强DNA疫苗免疫原性中是否有协同作用，本实验利用CPVVP2DNA疫苗对其进行了初步分析。
本实验利用含内部核蛋白体进入位点(IRES)的真核表达载体构建cIL-2和cIL-7双基因表达载体。然后利用本实验室构建的CPVVP2、cIL-2和cIL-7表达载体及本实验构建的双基因表达载体，以不同组合对小鼠进行免疫，即VP2单免疫，VP2+cIL-2、VP2+cIL-7和VP2+cIL-2/cIL-7共免疫。通过ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清VP2的抗体水平，并分析中和抗体的效价，通过细胞增殖实验检测免疫后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应，并用ELISA方法测定小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平。
结果表明，本实验构建的双基因表达载体结构正确，并能够介导cIL-2与cIL-7基因在真核细胞中进行同步分泌表达。小鼠免疫结果表明，VP2+cIL-2/cIL-7共免疫组小鼠血清的抗体滴度和中和抗体效价均显著高于VP2+cIL-2和VP2+cIL-7共免疫组(P＜0.05)。VP2+cIL-2/cIL-7共免疫组小鼠的淋巴细胞刺激指数比其它免疫组略有升高但尚未达到显著水平，然而γ干扰素的表达水平显著高于其它免疫组(P＜0.05)。综上所述，cIL-2和cIL-7基因对CPVVP2DNA疫苗免疫原性的增强作用具有明显的协同效应。
犬细小病毒病;DNA疫苗;协同免疫;增强作用;生物佐剂
河北农业大学
硕士
基础兽医学
仲飞
2013
中文
S858.292;S852.5
67
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）